Хулганы сүүлний шууд ПГУ-ын иж бүрдэл-UNG Шууд ПГУ-ын задралын урвалж(Хулганы сүүл)(генотип тогтоох зориулалттай)
Тодорхойлолт
Энэхүү иж бүрдэл нь хулганы сүүл, чих, булчин болон бусад эд эсийн дээжээс геномын ДНХ-ийг ПГУ-ын урвалд хурдан гаргахын тулд өвөрмөц лизисын буфер системийг ашигладаг тул том хэмжээний генетикийн шинжилгээ хийхэд тохиромжтой.
Лизисийн буферээс геномын ДНХ-г гаргах үйл явц 65°С-т 10-30 минутын дотор дуусна.Уураг, РНХ-г зайлуулах гэх мэт өөр процесс шаардлагагүй бөгөөд ялгарсан ул мөр ДНХ-ийг ПГУ-ын урвалын загвар болгон ашиглаж болно.
2× M1-PCR хялбарTMMix (UNG) нь 2× M1-PCR Easy үндсэн дээр dTTP-ийн оронд dUTP ашигладаг.TM Холих (UNG) ба UNG ферментийг (Урацил-Н-гликозилаз) нэмдэг бөгөөд энэ нь dUTP агуулсан загварыг нэгэн зэрэг доройтуулж чаддаг.ПГУ-ын урвалын өмнө UNG ферментийг uracil агуулсан ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг задлахад ашигладаг.UNG фермент нь урацил агуулаагүй загварт ямар ч нөлөө үзүүлэхгүй бөгөөд ингэснээр олшруулалтын өвөрмөц байдал, нарийвчлалыг баталгаажуулж, генетикийн томоохон шинжилгээ хийх боломжоос сэргийлнэ.ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдол гарсан.
D-Taq ДНХ полимераз нь шууд ПГУ-ын урвалд зориулж Foregene-ийн тусгайлан боловсруулсан ДНХ полимераз юм.D-Taq ДНХ полимераза нь олон төрлийн ПГУ-ын урвалын дарангуйлагчдад хүчтэй тэсвэртэй бөгөөд янз бүрийн нарийн төвөгтэй урвалын систем дэх ДНХ-ийн ул мөрийг үр дүнтэй өсгөж чаддаг ба олшруулах хурд нь 2Кб/мин хүрч чаддаг бөгөөд энэ нь ялангуяа Шууд ПГУ-ын урвалд тохиромжтой.
Үзүүлэлтүүд
50×20μl rxns, 200×20μl rxns, 500×20μl rxns, 2000×20μl rxns
Иж бүрдэл хэсгүүд
I хэсэг | Буфер УИХ-ын гишүүн |
Foregene Protease Plus | |
6 × ДНХ ачаалах буфер | |
II хэсэг | 2× M1 ПГУ хялбарTMХолих(UNG) |
Зааварчилгаа |
Онцлог, давуу тал
■ДНХ-ийн цэвэршүүлэлтийг цаг хугацаа их шаарддаг, үнэтэй хийх шаардлагагүй.
■ Түүврийн эрэлт бага, 5 мг хулганы эд эсвэл 2-5 мм хулганы сүүлийг турших боломжтой.
■ Нунтаглах, бутлах зэрэг тусгай эмчилгээ хийх шаардлагагүй, үйл ажиллагаа нь энгийн.
■ Оновчтой ПГУ-ын систем нь ПГУ-ыг илүү өндөр өвөрмөц чанар, ПГУ-ын урвал дарангуйлагчдад илүү тэсвэртэй болгодог.
■ Бохирдлын эсрэг ПГУ-ын систем 2×M1-ПГУ хялбарTMПГУ-ын бүтээгдэхүүнээс үүдэлтэй бохирдлыг үр дүнтэй арилгаж, олшруулалтын өвөрмөц байдал, нарийвчлалыг баталгаажуулдаг Mix (UNG).
Багцын параметрүүд
Хэрэглэх хүрээ: хулганы сүүл, хулганы чих, булчин болон бусад эд.
Дээж задралаас гарсан ДНХ: зөвхөн ПГУ-ын загвар болгон ашигладаг.
Энэхүү иж бүрдлийг дараахь зорилгоор ашиглаж болно: трансгенозыг тодорхойлох, амьтны генотип хийх гэх мэт.
Ажлын урсгал
Хадгалалт ба Хадгалах хугацаа
Энэ багцын I хэсгийг 2-8 хэмд хадгална.
Буфер AL урвалжийг хуурай нөхцөлд 12 сарын турш хадгалах боломжтой;Илүү удаан хадгалахын тулд 2-8 хэмд хадгалах боломжтой.
Foregene Protease урвалж нь өвөрмөц томъёотой.Түүний үйл ажиллагаа, тогтвортой байдлыг хангахын тулд 4℃ хэмд 12 сар хадгална.
Урвалж 6×ДНХ ачаалах буферийг 4℃ эсвэл -20℃ хэмд удаан хугацаагаар хадгалах боломжтой.
Энэ багцын II хэсгийг -20 хэмд хадгална.
Урвалж 2×M1 PCR EasyTM Mix(UNG), хэрвээ байнга хэрэглэдэг бол богино хугацааны (10 хоногийн дотор ашиглах) 4℃ хэмд хадгалах боломжтой.