• facebook
  • linkedin
  • youtube
хуудас_баннер

Полисахарид ба полифенол багатай ургамлын РНХ цэвэршүүлэх иж бүрдэл Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах иж бүрдэл

Багцын тодорхойлолт:

Cat.No.RE-05011/05014

Полифенол, полисахарид бага агуулсан ургамлын дээжээс нийт РНХ-ийг цэвэршүүлэх зориулалттай.

Полисахарид, полифенолын агууламж багатай ургамлын дээжээс өндөр чанарын нийт РНХ-г хурдан гаргаж авна.

RNase-гүй

ДНХ цэвэрлэх баганыг ашиглан ДНХ-г үр дүнтэй устгана

DNase нэмэлгүйгээр ДНХ-г устгана

Энгийн-бүх үйлдлүүд нь өрөөний температурт хийгддэг

Хурдан - 30 минутын дотор үйл ажиллагааг дуусгах боломжтой

Аюулгүй - органик урвалж ашиглаагүй


Бүтээгдэхүүний дэлгэрэнгүй

Бүтээгдэхүүний шошго

Түгээмэл асуултууд

НӨӨЦИЙГ ТАТАЖ АВАХ

Үзүүлэлтүүд

50 бэлтгэл, 200 бэлтгэл

Энэхүү иж бүрдэл нь Foregene-ийн боловсруулсан ээрэх багана болон томъёог ашигладаг бөгөөд энэ нь бага полисахарид, полифенол агуулсан ургамлын янз бүрийн эд эсээс өндөр цэвэршилттэй, өндөр чанартай нийт РНХ-ийг үр дүнтэй гаргаж авах боломжтой.Полисахарид эсвэл полифенолын агууламж өндөртэй ургамлын дээжийн хувьд РНХ олборлолтын үр дүнд илүү сайн байхын тулд Plant Total RNA Isolation Plus Kit ашиглахыг зөвлөж байна.Энэхүү иж бүрдэл нь ДНХ цэвэрлэх баганаар хангадаг бөгөөд энэ нь геномын ДНХ-ийг супернатант болон эд эсийн лизатаас амархан арилгаж чаддаг.Зөвхөн РНХ багана нь РНХ-г үр дүнтэй холбож чаддаг.Энэхүү хэрэгсэл нь олон тооны дээжийг нэгэн зэрэг боловсруулах боломжтой.

Бүхэл бүтэн систем нь RNase агуулаагүй тул цэвэршүүлсэн РНХ задрахгүй.Буфер PRW1 ба PRW2 буфер нь олж авсан РНХ нь уураг, ДНХ, ион, органик нэгдлээр бохирдохгүй байхыг баталгаажуулж чадна.

Иж бүрдэл хэсгүүд

PSL1 буфер, PS буфер, PSL2 буфер

Буфер PRW1, буфер PRW2

RNase-гүй ddH2O, ДНХ цэвэрлэх багана

Зөвхөн РНХ багана

Зааварчилгаа

Онцлог, давуу тал

■ Өрөөний температурт (15-25 ℃) бүх процессын турш мөсөн банн, бага температурт центрифуггүйгээр ажиллана.
■ RNase-гүй иж бүрэн иж бүрдэл, РНХ-ийн задралын талаар санаа зовох шаардлагагүй.
■ ДНХ цэвэрлэх багана нь ДНХ-тэй тусгайлан холбогддог тул уг хэрэгсэл нь DNase нэмэлгүйгээр геномын ДНХ-ийн бохирдлыг арилгах боломжтой.
■ Өндөр РНХ-ийн гарц: Зөвхөн РНХ багана ба өвөрмөц томъёо нь РНХ-г үр дүнтэй цэвэршүүлдэг.
■ Хурдан хурд: ажиллахад хялбар, 30 минутын дотор дуусгах боломжтой.
■ Аюулгүй байдал: органик урвалж шаардлагагүй.
■ Өндөр чанар: Цэвэршүүлсэн РНХ-ийн хэлтэрхийнүүд нь өндөр цэвэршилттэй, уураг болон бусад хольцгүй бөгөөд туршилтын янз бүрийн хэрэглээг хангах боломжтой.

123

Иж бүрдэл програм

Энэ нь полисахарид, полифенолын агууламж багатай шинэхэн эсвэл хөлдөөсөн ургамлын эдийн дээжээс (ялангуяа шинэхэн ургамлын навчны эдээс) нийт РНХ-ийг гаргаж авах, цэвэршүүлэхэд тохиромжтой.

Ажлын урсгал

ургамлын нийт РНХ-энгийн ажлын урсгал

Диаграм

Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах хэрэгсэл6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus нь полисахарид ба полифенолын 50 мг шинэхэн навчийг боловсруулж, 5% цэвэршүүлсэн РНХ-ийг электрофорезоор туршсан.
1: Банана
2: Гинкго
3: Хөвөн
4: Анар

Хадгалалт ба хадгалах хугацаа

Өрөөний температурт (15-25 ℃) хуурай орчинд 12 сар, 2-8 хэмд илүү удаан (24 сар) хадгалах боломжтой.

PSL1 буферийг 2-гидрокси-1-этантиол (заавал биш) нэмсний дараа 1 сарын турш 4 хэмд хадгалж болно.


  • Өмнөх:
  • Дараачийн:

  • Асуудлын шинжилгээний гарын авлага

    Танд тулгарч болох асуудлуудын талаархи дараах дүн шинжилгээУргамлын нийтRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

    Эргэлтийн багана бөглөрсөн байна

    Ээрэх баганын бөглөрөл нь РНХ-ийн гарцыг бууруулж эсвэл бүр цэвэршүүлж, РНХ авах боломжгүй болох ба олж авсан РНХ-ийн чанар бага байх болно.

    Нийтлэг шалтгааны шинжилгээ:

    1. Дээж бүрэн хугараагүй байна.

    Дээжний бүрэн бус хуваагдал нь ДНХ цэвэрлэх баганыг хааж, РНХ-ийн гарц, чанарт нөлөөлдөг.Дээжийг хуваахдаа хангалттай хэмжээний шингэн азотоор хурдан нунтаглаж, эсийн хана, эсийн мембран зэрэг эдийг аль болох задлахыг зөвлөж байна.Полифенол полисахаридын ургамлын дээжийн хувьд ургамлын нийт РНХ тусгаарлах хэрэгсэл Plus ашиглахыг зөвлөж байна.

    2. ДНХ цэвэрлэх баганаас тусгаарлагдсан супернатантыг соруулж, эсийн үлдэгдлийг соруулж авна.

    Сорогдсон эсийн үлдэгдэл нь РНХ шингээх процедурын үед зөвхөн РНХ агуулсан баганыг бөглөрөх боломжтой (процедурын 5-р алхам, полисахарид полифенолын процедурын 6-р алхамыг үзнэ үү).Бид эсийн үлдэгдлийг сорохоос зайлсхийхийн тулд энэ супернатантыг сорохдоо болгоомжтой байхыг зөвлөж байна.

    3. Дээжний анхны хэмжээ хэт их байна.

    Дээжийн хэт их хэрэглээ нь PRL1 буфер эсвэл PSL1 буферээр дээжийг бүрэн бус хуваах эсвэл эсийг бүрэн задлахад хүргэж, цэвэршүүлэх үйл ажиллагаанд зориулсан цэвэршүүлэх багана бөглөрнө.Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах иж бүрдэл нь хагалгаатай дээжийг нэг удаа цэвэршүүлэхэд хамгийн ихдээ 50 мг байна.Полифенол полисахаридын ургамлын дээжийн хувьд ургамлын нийт РНХ тусгаарлах иж бүрдэл Plus-ийг туршиж үзэхийг зөвлөж байна.

    4. Центрифугийн температур хэт бага байна.

    Дээжний эдийг шингэн азотоор тасалдуулахаас бусад тохиолдолд РНХ-г бүхэлд нь тусгаарлах, цэвэршүүлэх ажлыг өрөөний температурт (20-25 ° C) гүйцэтгэдэг.Зарим бага температурт центрифуг нь 20 °C-аас доош температуртай байдаг бөгөөд энэ нь ДНХ цэвэрлэх багана ба/эсвэл зөвхөн РНХ-ийн баганад бөглөрөл үүсгэдэг.Хэрэв ийм зүйл тохиолдвол центрифугийн температурыг 20-25 ° C хүртэл тохируулж, задралын хольц ба/эсвэл этилийн спиртийг ялгах супернатантыг 37 ° C хүртэл халаана.

    Ямар ч РНХ гаргаж аваагүй эсвэл РНХ-ийн гарц бага байна

    Сэргээх үр ашигт ихэвчлэн олон хүчин зүйл нөлөөлдөг, тухайлбал: дээжийн РНХ-ийн агууламж, үйл ажиллагааны арга, шингэний хэмжээ гэх мэт.

    Дараах нийтлэг шалтгаануудын шинжилгээ:

    1. Үйл ажиллагааны явцад мөсөн банн эсвэл бага температурт (4 ° C) центрифуг хийсэн.

    Зөвлөмж: Өрөөний температурт (15-25 ° C) бүх процессыг ажиллуулж, мөсөн банн, бага температурт центрифуг хийж болохгүй.

           2.Дээжийг буруу хадгалснаас эсвэл дээжийг удаан хугацаагаар хадгалснаас болж РНХ задарсан.

    Зөвлөмж: Шинээр цуглуулсан дээжийг шингэн азотоор хурдан хөлдөөж, дараа нь -80 хэмд удаан хугацаагаар хадгалах, дээжийг дахин хөлдөөх, гэсгээхээс зайлсхийх;эсвэл дээжийг РНХ тогтворжуулагчийн RNA дараачийн уусмалд (амьтны дээж) нэн даруй дэвтээнэ.

           3.Дээжний хуваагдал, задрал хангалтгүй байгаа нь цэвэршүүлэх баганыг бөглөрөхөд хүргэдэг.

    Зөвлөмж: Эдийг нунтаглахдаа эдийг хангалттай нунтаглаж, урьдчилан бэлтгэсэн PSL1 буфер руу хурдан шилжүүлнэ үү (зөв β-ME-ийн хувь нэмсэн эсэхийг баталгаажуулна уу, процедурын 1-р алхамыг үзнэ үү).

    4.Улгагчийг буруу нэмсэн.

    Зөвлөмж: RNase-Free ddH байгаа эсэхийг шалгаарай2O нь цэвэршүүлэх баганын мембраны дундуур дусдаг.

    5. PSL2 Buffer эсвэл Buffer PRW2-д үнэмлэхүй этилийн спиртийн зөв хэмжээг нэмээгүй.

    Зөвлөмж: Зааврыг дагаж, иж бүрдлийг хэрэглэхийн өмнө PSL2 болон Buffer PRW2-д үнэмлэхүй этилийн спиртийн хэмжээг зөв нэмээд сайтар холино уу.

    6.Эдийн дээжийн хэмжээ тохиромжгүй байна.

    Зөвлөмж: Buffer PSL1-ийн 500 мкл тутамд 50 мг эд хэрэглэнэ.Хэт их эдийг ашиглах нь гаргаж авсан РНХ-ийн хэмжээг бууруулж, үүссэн РНХ-ийн цэвэршилтийг мөн бууруулна.Дээжний анхны тунг РНХ олборлох үйл ажиллагаа бүрт 50 мг-аас хэтрэхгүй байхыг бид хатуу зөвлөж байна.

    7. Элюцийн хэмжээ зохисгүй буюу бүрэн бус шүүрэл.

    Зөвлөмж: Цэвэршүүлэх баганын элюентийн хэмжээ 50-200 мкл;Хэрэв шүүрлийн нөлөө хангалтгүй бол урьдчилан халаасан RNase-Free ddH нэмсний дараа өрөөний температурт хугацааг сунгахыг зөвлөж байна.2O, жишээ нь 5-10мин.

    8. Цэвэршүүлэх баганад PRW2 буферээр угаасны дараа этанолын үлдэгдэлтэй байна.

       Зөвлөмж: Хэрэв хоосон хоолойг 1 минутын турш центрифуг хийж, PRW2 буферт угаасны дараа этанол үлдвэл та хоосон хоолойг центрифуг хийх хугацааг 2 минут хүртэл нэмэгдүүлэх эсвэл этанолын үлдэгдлийг бүрэн арилгахын тулд цэвэршүүлэх баганыг тасалгааны температурт 5 минутын турш байрлуулж болно.

    9. Иж бүрдлийг буруу ашигласан.

       Зөвлөмж: Полифенол полисахаридын ургамлын дээжийн хувьд Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах хэрэгсэл гэх мэт нийтлэг иж бүрдлийг ашиглах нь хамгийн тохиромжтой РНХ дээж авах боломжгүй байж магадгүй юм.Полифенол полисахаридын ургамлын дээжинд тусгайлан зориулсан Plant Total RNA IsolationKit Plus-ийг ашиглахыг танд зөвлөж байна.Полифенол ба полисахаридын ургамлын дээжээс РНХ гаргаж авахад зориулж тусгайлан боловсруулсан иж бүрдэл.

    OD260/OD280 утга бага байна

    ddH бүхий РНХ-ийн ялгаруулалт2O ба спектрофотометрийн уншилтанд ашигласан нь OD260/OD280-ийн бага утгыг өгдөг.Бид 10 мМ Tris-HCl, рН 7.5 (RNase-Free ddH гэхээсээ илүү) ашиглахыг зөвлөж байна.2Харьцангуй зөв OD260/OD280 утгыг авахын тулд РНХ-г ялгахын тулд 19-р хуудасны “РНХ-ийн концентраци ба цэвэршүүлэх шинжилгээ”-г үзнэ үү.

    Цэвэршүүлсэн РНХ нь доройтдог

    Цэвэршүүлсэн РНХ-ийн чанар нь дээжийг хадгалах, RNase-ийн бохирдол, манипуляци зэрэг хүчин зүйлүүдтэй холбоотой байдаг.

    Нийтлэг шалтгаануудын шинжилгээ:

    1. Эдийн дээжийг цуглуулсны дараа хугацаанд нь хадгалаагүй.

        Зөвлөмж: Хэрэв эд эсийн дээжийг цуглуулсны дараа цаг тухайд нь ашиглаагүй бол нэн даруй шингэн азотод бага температурт хадгалах эсвэл шингэн азотод хурдан хөлдөөсний дараа -80 хэмд удаан хугацаагаар хадгалах эсвэл дээжийг РНХ тогтворжуулагчийн RNA дараачийн уусмалд (амьтны дээж) нэн даруй дүрнэ үү.РНХ гаргаж авахын тулд шинээр цуглуулсан эд эсийн дээжийг ашиглахыг хичээ.

    2.Эдийн дээжийг олон удаа хөлдөөх, гэсгээх.

       Зөвлөмж: Эдийн дээжийг хадгалахдаа жижиг хэсэг болгон хувааж, хадгалахдаа хэсэгчлэн гаргаж авах нь дээжийг олон удаа хөлдөөх, гэсгээх үед РНХ задрахаас сэргийлнэ.

    3.RNase-ийг хагалгааны өрөөнд нэвтрүүлсэн эсвэл нэг удаагийн бээлий, маск гэх мэтийг өмсөөгүй.

       Зөвлөмж: РНХ-ийн задралын туршилтыг тус тусад нь РНХ-ийн үйл ажиллагаанд хамгийн сайн хийдэг бөгөөд туршилтын өмнө лабораторийн ширээг цэвэрлэж, RNase-ийг нэвтрүүлснээр РНХ-ийн доройтлоос зайлсхийхийн тулд туршилтын явцад нэг удаагийн бээлий, амны хаалт зүүх хэрэгтэй.

    4. Ашиглалтын явцад урвалж RNase-ээр бохирдсон байна.

       Зөвлөмж: Холбогдох туршилтуудад зориулж ургамлын нийт РНХ олборлох иж бүрдлийг шинэ цувралаар солино уу.

    5.РНХ-г боловсруулахад ашигладаг центрифугийн хоолой болон пипеткийн үзүүрүүд RNase-ээр бохирдсон байна.

    Зөвлөмж: РНХ задлахад ашигласан центрифугийн хоолой, пипеткийн үзүүр, пипетк зэрэг нь бүгд RNase-гүй эсэхийг шалгаарай.

    Зааварчилгааны гарын авлага:

    Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах иж бүрдэл зааварчилгаа

    Энд мессежээ бичээд бидэнд илгээгээрэй