Вирусын ДНХ ба РНХ тусгаарлах иж бүрдэл Вирусын ДНХ ба РНХ-ийн хандыг цэвэршүүлэх бэлдмэл
Үзүүлэлтүүд
50 бэлтгэл, 200 бэлтгэл
Вирусын РНХ-ийн нуклейн хүчлийг цэвэршүүлэх тусгаарлах иж бүрдэл нь плазм, ийлдэс, эсгүй биеийн шингэн, эсийн өсгөвөрийн супернатант зэрэг дээжээс өндөр цэвэршилттэй, өндөр чанартай вирусын РНХ-ийг үр дүнтэй гаргаж авах боломжтой Foregene-ийн бүтээсэн ээрэх багана болон томъёог ашигладаг.Энэхүү хэрэгсэл нь дээжээс бага хэмжээний РНХ-г хялбархан авах боломжтой Шугаман акриламидыг тусгайлан нэмдэг.Зөвхөн РНХ багана нь РНХ-г үр дүнтэй холбож чаддаг.Энэхүү хэрэгсэл нь олон тооны дээжийг нэгэн зэрэг боловсруулах боломжтой.
Бүхэл бүтэн багц нь RNase агуулаагүй тул цэвэршүүлсэн РНХ задрахгүй.Buffer viRW1 болон Buffer viRW2 нь олж авсан вирусын нуклейн хүчлийг уураг, нуклеаз болон бусад хольцгүй байлгахыг баталгаажуулж, молекулын биологийн туршилтанд шууд ашиглаж болно.
Иж бүрдэл хэсгүүд
| Шугаман акриламид |
| DRL буфер |
| RW1 буфер, RW2 буфер |
| RNase-гүй ddH2O |
| ДНХ/РНХ багана |
| Зааварчилгаа |
Онцлог, давуу тал
■ Өрөөний температурт (15-25 ℃) бүх процессын турш мөсөн банн, бага температурт центрифуггүйгээр ажиллана.
■ RNase-гүй иж бүрэн иж бүрдэл, РНХ-ийн задралын талаар санаа зовох шаардлагагүй.
■ Нуклейн хүчлийн өндөр гарц: Зөвхөн ДНХ/РНХ багана ба өвөрмөц томъёо нь ДНХ болон РНХ-ийг үр дүнтэй цэвэршүүлдэг.
■ Том дээж боловсруулах хүчин чадал: 200μl хүртэлх дээжийг нэг удаад боловсруулж болно.
■ Хурдан хурд: ажиллахад хялбар, 20 минутын дотор дуусгах боломжтой.
■ Аюулгүй байдал: органик урвалж шаардлагагүй.
■ Өндөр чанар: Цэвэршүүлсэн РНХ-ийн хэлтэрхийнүүд нь өндөр цэвэршилттэй, уураг болон бусад хольцгүй бөгөөд туршилтын янз бүрийн хэрэглээг хангах боломжтой.
Иж бүрдэл програм
Энэ нь сийвэн, ийлдэс, эсгүй биеийн шингэн, эсийн өсгөвөрийн супернатант зэрэг дээжинд вирусын нуклейн хүчлийг гаргаж авах, цэвэрлэхэд тохиромжтой.
Ажлын урсгал
Диаграм
Хадгалалт ба Хадгалах хугацаа
■ Энэхүү иж бүрдлийг тасалгааны температурт (15-25℃) хуурай нөхцөлд 24 сар хадгалах боломжтой;Хэрэв удаан хугацаагаар хадгалах шаардлагатай бол 2–8℃ хэмд хадгалах боломжтой.
■ Шугаман акриламидын уусмалыг тасалгааны температурт 7 хоногийн турш хадгалах боломжтой;иж бүрдлийг хүлээн авсны дараа гаргаж аваад -20 хэмд хадгална уу.
■ Buffer DRL-д Linear Acrylamide-г нэмсний дараа 2-8°C-т 48 цаг хүртэл хадгалах боломжтой.Бэлэн болсон шийдлийг ашиглана уу.
Асуудлын шинжилгээний гарын авлага
Дараах нь вирусын ДНХ/РНХ-ийг задлахад тулгарч болох асуудлуудын дүн шинжилгээ бөгөөд таны туршилтанд тустай байх болно.Нэмж дурдахад, ашиглалтын заавар, асуудлын дүн шинжилгээнээс бусад туршилтын болон техникийн асуудлуудын хувьд бид танд туслах техникийн дэмжлэг үзүүлж байна.Хэрэв танд ямар нэгэн хэрэгцээ байгаа бол бидэнтэй холбогдоно уу: 028-83360257 эсвэл И-мэйл:
Tech@foregene.com.
Нуклейн хүчлийн олборлолт байхгүй эсвэл нуклейн хүчлийн гарц бага
Сэргээх үр ашигт ихэвчлэн олон хүчин зүйл нөлөөлдөг, тухайлбал: дээжийн нуклейн хүчлийн агууламж, үйл ажиллагааны арга, шингэний хэмжээ гэх мэт.
Нийтлэг шалтгаануудын шинжилгээ:
1. Процедурын явцад мөсөн банн эсвэл бага температурт (4 ° C) центрифуг хийсэн.
Зөвлөмж: Тасалгааны температурт (15-25°С) бүх процессын турш ажиллана, мөстэй халуун ус, бага температурт центрифуг хийж болохгүй.
2. Дээжийг буруу хадгалсан эсвэл дээжийг хэт удаан хадгалсан.
Зөвлөмж: Дээжийг -80°С хэмд хадгалж, дахин хөлдөөх, гэсгээхээс зайлсхийх;нуклейн хүчлийг гаргаж авахад шинээр цуглуулсан дээжийг ашиглахыг хичээ.
3. Дээжний задрал хангалтгүй.
Зөвлөмж: Дээж болон задралын ажлын уусмалыг сайтар хольж, тасалгааны температурт (15-25°С) 10 минутын турш өсгөвөрлөнө.
4. Элюантыг буруу нэмсэн.
Зөвлөмж: RNase-Free ddH2O-ийг цэвэршүүлэх баганын мембраны дунд дусал дуслаар нэмж, цэвэршүүлэх баганын цагираг дээр бүү хая.
5. RW2 Buffer-д абсолют этанолын зөв хэмжээг нэмээгүй.
Зөвлөмж: Зааврыг дагаж, RW2 Buffer-д абсолют этанолын зөв хэмжээг нэмж, иж бүрдлийг хэрэглэхийн өмнө сайтар холино уу.
6. Түүврийн хэмжээ зохисгүй.
Зөвлөмж: 500μl Buffer DRL тутамд 200μл дээж боловсруулдаг.Дээжийг хэт их боловсруулснаар нуклейн хүчлийн олборлолтын гарц багасна.
7. Элюцийн хэмжээ зохисгүй буюу бүрэн бус шүүрэл.
Зөвлөмж: Цэвэршүүлэх баганын элюентийн хэмжээ 30-50μl;хэрэв шүүрлийн нөлөө хангалтгүй бол урьдчилан халаасан RNase-Free ddH2O нэмсний дараа тасалгааны температурт хугацааг сунгахыг зөвлөж байна, тухайлбал 5-10мин.
8. RW2 Buffer-ээр угаасны дараа багана дээр этилийн спирт үлдэнэ.
Зөвлөмж: Хэрэв RW2 буферээр центрифуг хийсний дараа этилийн спирт 2 минутын турш үлдвэл этанолын үлдэгдлийг бүрэн арилгахын тулд баганыг центрифугийн дараа 5 минутын турш тасалгааны температурт байрлуулж болно.
Цэвэршүүлсэн нуклейн хүчлийг задалдаг
Цэвэршүүлсэн нуклейн хүчлийн чанар нь дээжийг хадгалах, RNase-ийн бохирдол, үйл ажиллагаа болон бусад хүчин зүйлээс хамаарна.Нийтлэг шалтгаануудын шинжилгээ:
1. Цуглуулсан дээжийг хугацаанд нь хадгалаагүй.
Зөвлөмж: Хэрэв дээжийг цуглуулсны дараа цаг тухайд нь ашиглаагүй бол нэн даруй -80 хэмд бага температурт хадгална уу.РНХ гаргаж авахын тулд шинээр цуглуулсан дээжийг ашиглахыг хичээ.
2. Дээж цуглуулж дахин дахин хөлдөөж гэсгээнэ.
Зөвлөмж: Дээж цуглуулах, хадгалах явцад хөлдөөх, гэсгээхээс (нэгээс илүүгүй удаа) зайлсхий, эс тэгвээс нуклейн хүчлийн гарц багасна.
3. Хагалгааны өрөөнд RNase нэвтрүүлсэн эсвэл нэг удаагийн бээлий, маск гэх мэтийг өмсдөггүй.
Зөвлөмж: РНХ олборлох туршилтыг РНХ-ийн хагалгааны тусдаа өрөөнд хийх нь хамгийн сайн арга бөгөөд туршилтын өмнө лабораторийн ширээг цэвэрлэх хэрэгтэй.
Туршилтын явцад RNase-ийн нөлөөгөөр РНХ-ийн задралаас зайлсхийхийн тулд нэг удаагийн бээлий, маск өмс.
4. Ашиглалтын явцад урвалж RNase-ээр бохирдсон.
Зөвлөмж: Холбогдох туршилтуудад зориулж шинэ Вирусын ДНХ/РНХ тусгаарлах иж бүрдэлээр солих.
5. РНХ-г боловсруулахад ашигладаг центрифугийн хоолой болон пипеткийн үзүүрүүд RNase-ээр бохирдсон байна.
Зөвлөмж: РНХ задлахад ашигладаг центрифугийн хоолой, пипеткийн үзүүр, пипетк зэрэг нь бүгд RNase-гүй эсэхийг шалгаарай.
Цэвэршүүлсэн нуклейн хүчил нь доод урсгалын туршилтуудад нөлөөлдөг
Цэвэршүүлэх баганаар цэвэршүүлсэн ДНХ ба РНХ, хэрэв давсны ион ба уургийн агууламж хэт өндөр байвал энэ нь дараах туршилтуудад нөлөөлнө, тухайлбал: ПГУ-ын олшруулалт, урвуу транскрипц гэх мэт.
1. Тунгаасан ДНХ ба РНХ нь давсны үлдэгдэлтэй ионтой.
Зөвлөмж: RW2 Buffer-д абсолют этанолын хэмжээг зөв нэмсэн эсэхийг шалгаж, цэвэрлэх баганыг ашиглалтын зааварт заасан центрифугийн хурдаар хоёр удаа угаана;Давсны ионы бохирдлыг багасгахын тулд центрифуг хийнэ.
2. Элутлагдсан ДНХ ба РНХ нь этанолын үлдэгдэлтэй.
Зөвлөмж: RW2 Buffer-ээр угааж баталгаажуулсны дараа ашиглалтын зааварт заасан центрифугийн хурдаар хоосон хоолойгоор центрифуг хийнэ;Хэрэв этанолын үлдэгдэл хэвээр байгаа бол та хоосон хоолойг центрифуг хийж, дараа нь этилийн спиртийн үлдэгдлийг хамгийн их хэмжээгээр арилгахын тулд өрөөний температурт 5 минутын турш байрлуулж болно.
Зааварчилгааны гарын авлага:
Вирусын ДНХ, РНХ тусгаарлах иж бүрдэл зааварчилгаа
