Боломжит асуудлуудын дараах дүн шинжилгээБуккаларчдас/ЧХХ card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Цэвэршүүлэх багана бөглөрсөн байна

Энэхүү иж бүрдэлд ДНХ-ийн геномын экстракцийн үйл ажиллагаанд цэвэршүүлэх багана нь центрифугийн шатлалгүйгээр дээжийн ферментийн задралын хольц дээр шууд шингэдэг бөгөөд дээжийн ферментжилт бүрэн бус, өндөр зуурамтгай чанар зэргээс шалтгаалан цэвэршүүлэх багана бөглөрөх магадлалтай.

Дараах боломжит шалтгаанууд нь дараах байдалтай байна.

1. Эдийн дээжийн ферментийн боловсруулалт бүрэн бус.

Зөвлөмж: Foregene Protease-ийн дээж боловсруулах хугацааг зохих ёсоор сунгаж эсвэл 12,000 эрг/мин (~13,400) центрифуг хийсний дараа дээд давхаргыг авч болно.× g) 5 минутын турш.

2. Эд эсийн дээж эсвэл том эдийг хэт их хэрэглэх.

Зөвлөмж: 1-ээс хэтрэхгүй байх нь дээрБуккал дээж дэх арчдас;хэрэв дээж хэт том байвал буфер ST1, Foregene Protease, ST2 буферийн тунг зохих хэмжээгээр нэмэгдүүлнэ.

3. Дээжний зуурамтгай чанар хэт өндөр байна.

Зөвлөмж: Дээжийг геномын ДНХ олборлохын өмнө 10 мМ Tris-HCl-ээр зохих ёсоор шингэлж болно.

4. Цусны картын хэлтэрхий сорсон байна.

Зөвлөмж: Цусны толбо (FTA Card) геномын олборлолтын 6-р алхамын түр зуурын центрифугийн хугацааг зохих ёсоор сунгаж болно.

Бага ургац эсвэл ДНХ байхгүй

Дээжийн гарал үүсэл, дээж хадгалах нөхцөл, дээж бэлтгэх, манипуляци хийх гэх мэт геномын ДНХ-ийн гарцад нөлөөлдөг олон янзын хүчин зүйлүүд байдаг.

Олборлох явцад геномын ДНХ авах боломжгүй

Боломжит шалтгаанууд нь дараах байдалтай байна.

1. Дээжийг буруу хадгалах эсвэл хэт удаан хадгалах нь геномын ДНХ-ийн задралд хүргэдэг.

Зөвлөмж: Амны хөндийн арчдасыг шинээр дээж авах нь зүйтэй бөгөөд ДНХ-ийн геномын задралын үйл ажиллагаанд хадгалсан арчдас ашиглахыг зөвлөдөггүй;Цусны толбоны дээж нь чанарын шаардлага хангасан байх ёстой бөгөөд хадгалах хугацаа хэт урт байх ёсгүй.

2. Эд эсийг хэт бага хэрэглэх нь харгалзах геномын ДНХ-г гаргаж авахгүй байж болзошгүй.

Зөвлөмж: дагаарайbuccal Арчдасаас дээж авах зааварчилгааг үйл ажиллагааны зааварт бичиж, геномын ДНХ гаргаж авахын тулд амны хөндийн арчдасанд хангалттай эсийг хавсаргахын тулд аль болох олон удаа арчина;Цусны толбоны дээж авахын тулд цусны толбо зүсэх хэсгийг зохих ёсоор нэмэгдүүлэх боломжтой.

3. Foregene Protease нь зохисгүй хадгалагдаж, улмаар идэвхи нь буурч, идэвхгүй болдог.

Зөвлөмж: Хадгалах нөхцлийг баталгаажуулна ууФoregene Protease эсвэл ферментийн урвалын шинэ Foregene Protease-ээр солино.

4. Иж бүрдлийг буруу хадгалсан эсвэл хадгалах хугацаа хэтэрхий урт байгаа нь иж бүрдэл дэх зарим бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн эвдрэлд хүргэдэг.

Зөвлөмж: Шинээр худалдаж аваарайБуккал арчдас ДНХтусгаарлалт холбогдох процедурт зориулсан иж бүрдэл.

5. Буфер ДБ нь абсолют этанол нэмдэггүй.

Зөвлөмж: Буфер ДБ нь абсолют этанолын зөв хэмжээг нэмж байгааг баталгаажуулна уу.

6. Силикон хальсанд уусгагчийг зөв нэмээгүй.

Зөвлөмж: 65 нэмнэ үү°CУрьдчилан халаасан уусмалыг силикон мембраны дунд хүртэл дусааж, шүүрлийн үр ашгийг нэмэгдүүлэхийн тулд тасалгааны температурт 5 минут байлгана.

Lөндөр гарцтай геномын ДНХ тусгаарлагдсан

Дараах боломжит шалтгаанууд нь дараах байдалтай байна.

1. Дээжийг буруу хадгалах эсвэл хэт удаан хадгалах нь геномын ДНХ-ийн задралд хүргэдэг.

Зөвлөмж: Амны хөндийн арчдасыг шинээр дээж авсан нь дээр бөгөөд хадгалсан арчдасыг геномын ДНХ-ийн задралд ашиглаж болохгүй.

2. Хэрэв эд эсийн дээжийн хэмжээ хэтэрхий бага байвал олборлосон геномын ДНХ-ийн агууламж бага байх болно.

Зөвлөмж: Үйл ажиллагааны зааварт заасан амны хөндийн арчдасаас дээж авах зааврыг дагаж, геномын ДНХ гаргаж авахын тулд амны хөндийн арчдас руу хангалттай эсийг хавсаргахын тулд аль болох олон удаа арчина.

3. Foregene Protease нь зохисгүй хадгалагдаж, улмаар идэвхи нь буурч, идэвхгүй болдог.

Зөвлөмж: Хадгалах нөхцлийг баталгаажуулна ууthe Foregene Protease эсвэл шинээр солино Ферментийн урвалд зориулсан Foregene Protease.

4. Угаах бодисын асуудал.

Зөвлөмж: Буфер EB-г шүүрүүлэхэд ашиглах;ddH ашиглаж байгаа бол₂O эсвэл бусад шүүрүүлэгчийн рН нь 7.0-8.5 хооронд байгаа эсэхийг баталгаажуулна.

5. Элюатыг дуслаар зөв нэмээгүй.

Зөвлөмж: Элюент дуслыг силикон мембраны голд нэмж, тасалгааны температурт 5 минут байлгана.

6. Угаах шингэн нь хэтэрхий бага хуримтлагддаг.

Зөвлөмж: Доод тал нь зааврын дагуу геномын ДНХ-ийн ялгаруулалтад элюент хэрэглээрэйдутуугүй 15-аас дээшμl.

Lөө цэвэр ариун of геномын ДНХтусгаарлагдсан

Геномын ДНХ-ийн цэвэршилт бага байгаа нь дараах туршилтуудын бүтэлгүйтэл эсвэл хангалтгүй үр дүнд хүргэдэг, тухайлбал: ферментийг задлах боломжгүй, ПГУ-ын генийн хэсгийг авах боломжгүй гэх мэт.

Боломжит шалтгаанууд нь дараах байдалтай байна.

1. Гетеропротейны бохирдол, РНХ-ийн бохирдол.

Шинжилгээ: Цэвэршүүлэх баганыг Buffer PW ашиглан угаагаагүй;Buffer PW угаах цэвэршүүлэх баганыг зөв төвөөс зугтах хурдыг ашиглан угаагаагүй.

Зөвлөмж: Этанол нэмэхийн өмнө хэт шингэнд хур тунадас байхгүй эсэхийг шалгаарай;зааврын дагуу цэвэршүүлэх баганыг угаахаа мартуузай, энэ алхамыг орхигдуулж болохгүй.

2. Бохирдлын ионы бохирдол.

Шинжилгээ: Буфер WB угаах цэвэршүүлэх баганыг орхисон эсвэл зөвхөн нэг удаа угаасан тул ионы бохирдол үүссэн.

Зөвлөмж: Үлдэгдэл ионуудыг аль болох арилгахын тулд Buffer WB-ийг зааврын дагуу 2 удаа угаахаа мартуузай.

3. РНХ ферментийн бохирдол.

Шинжилгээ: Гадаад RNases буферт нэмэгдсэн;Буферийн PW угаах ажиллагаа буруу байсан тул RNase-ийн үлдэгдэл үүсч, in vitro транскрипц гэх мэт доод урсгалын РНХ-ийн туршилтын үйл ажиллагаанд нөлөөлсөн.

Зөвлөмж: Foregene цувралын нуклейн хүчилизолаиж бүрдэл нь нэмэлт RNase нэмэлгүйгээр РНХ-г устгаж чаддаг.ингэж buccal Swab/FTA Card ДНХ тусгаарлах иж бүрдэлхэрэгтэй't RNase нэмэх;Buffer PW угаах цэвэршүүлэх баганын зааврыг дагаж мөрдөх ёстой бөгөөд энэ алхамыг орхигдуулж болохгүй.

4. Этанолын үлдэгдэл.

Шинжилгээ: Буфер WB цэвэршүүлэх баганыг угаасны дараа хоосон хоолойн центрифуг хийгээгүй.

Зөвлөмж: Зааврын дагуу хоосон хоолойн центрифугийн ажиллагааг зөв хийнэ.

5. Бусад хольцын бохирдол.

Шинжилгээ: Хадгалсан дээж эсвэл тусгай дээжийг урьдчилан боловсруулаагүй болно.

Зөвлөмж: Зааврын дагуу дээжийг сайтар урьдчилан боловсруулна.