Туршилтын ажилтнуудын зан үйлийг стандартчилахын тулд ПГУ-ын туршилтын SOP-ийг бий болгох.
Туршилтын ажилтан нь үйл ажиллагааны горимыг чанд мөрдөж, хүний хүчин зүйлээс үүдэлтэй ПГУ-ын бохирдлыг багасгах эсвэл бохирдол үүсэхээс сэргийлнэ.Түүнчлэн туршилт хийгч нь холбогдох тоног төхөөрөмжийг ажиллуулах, ажлын бүх үйл явцыг тодорхой болгох, бохирдлыг цэвэрлэх арга, лабораторийн чанарын хяналтын аргуудыг эзэмшсэн байх, шинжилгээний үр дүнг зөв тайлбарлах чадвартай байх зэрэг холбогдох мэргэжлийн мэдлэг, ур чадвартай байх ёстой.
Стандарт ПГУ-ын лаборатори байгуулах.
ПГУ-ын лаборатори нь зарчмын хувьд урвалж бэлтгэх хэсэг, дээж боловсруулах талбай, олшруулах талбай, олшруулалтын бүтээгдэхүүний шинжилгээний хэсэг гэсэн дөрвөн хэсэгт хуваагддаг.Эхний хоёр хэсэг нь өсгөлтийн өмнөх хэсэг, сүүлийн хоёр хэсэг нь өсгөлтийн дараах хэсэг юм.Олшруулахын өмнөх бүс ба өсгөлтийн дараах бүсийг хатуу тусгаарлах хэрэгтэй.Туршилтын материал, урвалж, бичлэгийн цаас, үзэг, цэвэрлэгээний материал гэх мэт нь зөвхөн олшруулахын өмнөх хэсгээс олшруулалтын дараах хэсэг рүү, өөрөөр хэлбэл урвалж бэлтгэх хэсэг → дээж боловсруулах хэсэг → олшруулалтын хэсэг → олшруулалтын бүтээгдэхүүний шинжилгээний талбараас урсах ба хойшоо урсах ёсгүй.Лабораторийн агаарын урсгал нь мөн өсгөлтийн өмнөх бүсээс өсгөлтийн дараах хэсэг рүү урсах ёстой бөгөөд буцаж урсахгүй.ПГУ-ын хамгийн тохиромжтой лабораторийн загварыг доор үзүүлэв.
Зураг А: Буфер өрөөнд сөрөг даралттай ПГУ-ын лабораторийн хамгийн тохиромжтой тохиргоо
Зураг Б: Буфер өрөөнд эерэг даралттай ПГУ-ын лабораторийн хамгийн тохиромжтой тохиргоо
Зураг А ба Зураг В-д өгөгдсөн ПГУ-ын лабораторийн тохиргооны диаграммууд нь илүү тохиромжтой тохиргооны горим байх ёстой бөгөөд нөхцөл бүхий лаборатори нь дизайн хийхдээ энэ горимыг ашиглаж болно.Энгийн лабораторийн хувьд ПГУ-ын олшруулалтын хэсэг болон бүтээгдэхүүний шинжилгээний хэсгийг салгаж болох бөгөөд дээж бэлтгэх хэсэг болон ПГУ-ын олшруулалтын талбайд тагны нээлхийг аль болох багасгахыг зөвлөж байна.Санаж байна уу: Бүтээгдэхүүний шинжилгээний хэсэгт байгаа бүтээгдэхүүн, туршилтын материалыг дээж бэлтгэх хэсэг болон ПГУ-ын олшруулах талбарт аваачихыг хатуу хориглоно.
Хэрэв лаборатори нь зөвхөн ПГУ-ын илрүүлэлт, таних ажлыг гүйцэтгэдэг бол ердийн ПГУ-ын оронд флюресцент тоон ПГУ-ыг ашиглахыг зөвлөж байна.
Флюресценцийн тоон ПГУ-ын илрүүлэлтийн үр дүнг флюресценцийн дохиогоор цуглуулж, дүн шинжилгээ хийх боломжтой тул урвалын дараа электрофорез хийх тагийг онгойлгох шаардлагагүй бөгөөд энэ нь урвалын бүтээгдэхүүн гоожиж аэрозоль үүсгэхээс үүдэлтэй ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдлоос сэргийлдэг.Хэрэв та гель электрофорезын ачааллын үе шатанд тагны нүхний тоог нэмэгдүүлбэл аэрозолын бохирдол үүсэх магадлалтай.Тоон ПГУ-ын хэрэглээг дэмжих, чанарын ПГУ-ыг аажмаар орлуулахыг зөвлөж байна.
ПГУ-ын урвалд UNG-ийн эсрэг бүтээгдэхүүн бохирдуулах системийг ашигладаг.
Систем нь dTTP-ийн оронд dUTP ашигладаг.ПГУ-ын урвалын дараа бүх ПГУ-ын бүтээгдэхүүн (ДНХ-ийн хэлтэрхий) dUTP-тэй нэгддэг;ПГУ-ын урвалын дараагийн шатанд системд нэмсэн UNG ферментийг ПГУ-аас өмнө 5 минутын турш 37°С-т өсгөвөрлөж, энэ нь dUTP агуулсан бүх ДНХ-ийн хэсгүүдийг тусгайлан задалж, дараа нь ПГУ-ын урвалыг гүйцэтгэдэг.Энэ нь ПГУ-ын бүтээгдэхүүнээс үүдэлтэй аэрозолийн бохирдлыг бүрэн арилгах боломжтой.Үр нөлөөг доорх зурагт үзүүлэв.
Тайлбар: Шууд ПГУ-ын цувралын хувьд та Foregene-ийн ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдлын эсрэг системийн цуврал бүтээгдэхүүнийг сонгож болно.Санал болгох
Томоохон хэмжээний генотипийн шинжилгээ хийдэг лабораториудад боломжийн лаборатори байгуулахаас гадна урвалжуудыг туршихын тулд UNG-ийн эсрэг ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдлын системийг ашиглахыг зөвлөж байна.
Сануулга: Энэ системийг ашигласнаар аль хэдийн үүссэн ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдлыг арилгах боломжгүй.Иймд холбогдох туршилтын эхэнд UNG системийг ашиглах ёстой бөгөөд ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдлоос сэргийлэхийн тулд UNG системийг ПГУ-ын олшруулалтад ашиглах нь зүйтэй.
Том хэмжээний туршилт хийхдээ Foregene-ийн Direct PCR-UNG системийг ашиглахыг зөвлөж байна, тухайлбал:
Ургамлын навчны шууд ПГУ-ын иж бүрдэл-UNG；
Ургамлын үрийн шууд ПГУ-ын иж бүрдэл-UNG；
Амьтны эдийн шууд ПГУ-ын иж бүрдэл-UNG；
Хулганы сүүлний шууд ПГУ-ын хэрэгсэл-UNG；
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Foregene-ийн энэхүү цуврал иж бүрдэлнь ПГУ-ын илрүүлэлтийг хурдан бөгөөд өргөн цар хүрээтэй хийхээс гадна ПГУ-ын бүтээгдэхүүний бохирдлоос урьдчилан сэргийлэх, хянах боломжтой.
Шуудангийн цаг: 2021 оны 3-р сарын 19
