mRNA вакцин гэж юу вэ
mRNA вакцин нь in vitro-д холбогдох өөрчлөлтийн дараа уургийн эсрэгтөрөгчийг илэрхийлэх, үйлдвэрлэхийн тулд РНХ-ийг биеийн эсүүдэд шилжүүлж, улмаар бие махбодийг эсрэгтөрөгчийн эсрэг дархлааны хариу урвал үүсгэж, улмаар биеийн дархлааны чадавхийг нэмэгдүүлдэг.[1,3].
Зураг 1: мРНХ вакцины шууд тарилгын нөлөөний бүдүүвч диаграмм [2]
мРНХ вакцины ангилал
мРНХ вакциныг хоёр төрөлд хуваадаг.хуулбарлахгүймРНХ баөөрийгөө өсгөхмРНХ: өөрөө олшруулдаг мРНХ нь зорилтот эсрэгтөрөгчийг кодлохоос гадна эсийн доторх РНХ-ийн олшруулалт, уургийн экспрессийн механизмыг идэвхжүүлдэг репликацийг кодлодог.Хуулбарлах чадваргүй мРНХ вакцин нь зөвхөн зорилтот эсрэгтөрөгчийг кодлодог бөгөөд 5' ба 3' орчуулагдаагүй бүсүүдийг (UTR) агуулдаг.Эдгээр нь дасан зохицох чадвар, төрөлхийн дархлаа, тухайлбал, in situ эсрэгтөрөгчийн илэрхийлэл, аюулын дохио дамжуулалтыг цогцоор нь өдөөдөг бөгөөд дараах хэрэглээтэй.[2,3]
●Дасан зохицох чадвар, төрөлхийн дархлаа, тухайлбал, in situ эсрэгтөрөгчийн илэрхийлэл, аюулын дохио дамжуулалтыг цогцоор нь өдөөж чадна.
●Хошин ба эсийн нөлөө, дархлааны ой санамж зэрэг "тэнцвэртэй" дархлааны хариу урвалыг өдөөж болно.
●Вакцины найрлага дахь нарийн төвөгтэй байдлыг нэмэгдүүлэхгүйгээр өөр өөр эсрэгтөрөгчийг нэгтгэх боломжтой
●Дархлааны чадавхийг тасралтгүй сайжруулахад давтан вакцин хийлгэснээр хүрч болох ба тээгчийн дархлааны хариу урвал байхгүй эсвэл бага байдаг.
●Халуунд тогтвортой мРНХ вакцинууд нь вакцины тээвэрлэлт, хадгалалтыг хялбаршуулдаг.
Зураг 2: мРНХ вакцин ба түүний эсрэгтөрөгчийг илэрхийлэх механизмын бүдүүвч диаграмм [4]
mRNA вакцины онцлог
Уламжлалт вакцинтай харьцуулахад мРНХ вакцин нь энгийн үйлдвэрлэлийн процесс, хурдан хөгжих хурд, эсийн өсгөвөрлөх шаардлагагүй, хямд өртөгтэй байдаг.ДНХ-ийн вакцинтай харьцуулахад мРНХ вакцин нь цөмд орох шаардлагагүй бөгөөд эзэн геномд нэгдэх эрсдэлгүй.Хагас задралын хугацааг өөрчлөлтөөр тохируулж болно.
Хүснэгт 1: mRNA вакцины давуу болон сул талууд
|
| Давуу тал | Дутагдал |
| мРНХ вакцин | Шуурхай судалгаа, боловсруулалт, вакцин үйлдвэрлэхэд ердөө 40 хоног зарцуулдаг | Шаардлагагүй дархлааны хариу урвалыг өдөөх
|
| Физиологийн нөхцөлд мРНХ-ийн тогтворгүй байдал, задрахад хялбар | Боломжит эмчилгээний мутациас зайлсхийхийн тулд геномд нэгтгэхгүй
| |
| Цөмийн нутагшуулах дохио, транскрипц шаардлагагүй | Аюулгүй байдлын цөмийн үр нөлөөг шалгах шаардлагатай хэвээр байна
|
Зураг 3: мРНХ вакцин үйлдвэрлэх, бэлтгэх урсгалын диаграм [4]
Foregene Viral RNA тусгаарлах иж бүрдэл
RT-qPCR хялбар (Нэг алхам)
mRNA вакциныг бэлтгэх стратеги сайжирсан
МРНХ-ийн тогтвортой байдал муу, эд эсэд нуклеазаар амархан задалдаг, эсэд нэвтрэх чадвар бага, орчуулгын үр ашиг багатай тул эдгээр согогууд нь мРНХ-ийн вакцины хэрэглээг хязгаарладаг.Орчуулгын үр ашиг бас маш чухал үүрэг гүйцэтгэдэг.Хүргэлтийн тээврийн хэрэгслийг вирусын вектор ба вирусын бус вектор (липосом, липосом бус, вирус, нано бөөмс гэх мэт) гэж хувааж болно.Тиймээс холбогдох сайжруулах арга хэмжээ авах шаардлагатай байна.Дараах нь мРНХ бэлтгэхэд зориулсан фармакологийг сайжруулах стратеги юм[2]
1 МРНХ-г тогтворжуулах, эукариот орчуулгын эхлэлийн хүчин зүйл 4E (EIF4E)-тэй холбогдож уургийн орчуулгыг нэмэгдүүлэхийн тулд тагны аналогийг нийлэгжүүлэх эсвэл хязгаарлах ферментийг ашиглана.
2 mRNA-г тогтворжуулах, уургийн орчуулгыг нэмэгдүүлэхийн тулд 5′-орчуулаагүй бүс (UTR) ба 3′-UTR дахь элементүүдийг тохируулна.
3 Поли(A) сүүлийг нэмснээр мРНХ-г тогтворжуулж, уургийн орчуулгыг нэмэгдүүлнэ
4 Өөрчлөгдсөн нуклеозидууд нь төрөлхийн дархлааны идэвхжлийг бууруулж, орчуулгыг нэмэгдүүлэх
5 RNase III болон хурдан уургийн шингэн хроматографи (FPLC) цэвэршүүлэх эмчилгээ нь дархлааны идэвхжлийг бууруулж, орчуулгыг нэмэгдүүлэх боломжтой.
6 Орчуулгыг нэмэгдүүлэхийн тулд дараалал эсвэл кодонуудыг оновчтой болго
7 Орчуулгын эхлэлийн хүчин зүйлс болон орчуулга ба дархлаажуулалтыг өөрчлөх бусад аргуудыг хамтран хүргэх
Зураг 4: In vitro транскрипцийн (IVT) мРНХ үйлдвэрлэх, угсрах үйл явц [5]
Плазмид ДНХ-ийн их хэмжээний бэлтгэл
Плазмид ДНХ цэвэршүүлэх нь РНХ, задгай тойрог ДНХ-ийн эндотоксин, эзэн уураг, эзэн нуклейн хүчил зэрэг бохирдуулагчийг голчлон зайлуулж, ихэвчлэн рекомбинант плазмидыг E. coli болгон хувиргадаг.E. coli нь өндөр нягтаршилтай исгэж, дараа нь хатуу шингэнийг ялгаж, коли цуглуулдаг.Дараа нь E. coli-д шүлтлэг задрал, төвөөс зугтах хатуу шингэнийг ялгах, задралын дараа микрофильтраци, тунгалагжуулсны дараа хэт шүүлтүүр ба концентраци, дараа нь хроматографийн аргаар цэвэршүүлнэ.
Плазмид ДНХ-ийн цэвэршилт:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.мРНХ疫苗研究进展及挑战[Ж].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Парди Н, Хоган МЖ, Портер ФВ, нар.мРНХ вакцин - вакцин судлалын шинэ эрин үе[J].Байгалийн тойм Эмийн нээлт, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) РНХ вакцины танилцуулга.Үүнд: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Молекул биологийн аргууд, боть 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.мРНХ нь халдварт өвчнийг хянах вакцин боловсруулах хувиргах технологи[J].Молекул эмчилгээ, 2019 он.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, , Төрөлхийн/дасан зохицох дархлааны хариу урвалыг тэнцвэржүүлэхийн тулд мРНХ вакциныг тохируулах нь, Молекулын анагаах ухааны чиг хандлага, Боть 26, Дугаар 3,2020, Хуудас 311-323.
Шуудангийн цаг: 2021 оны 8-р сарын 05-ны хооронд
