• facebook
  • linkedin
  • youtube

Иммуноглобулин (Ig) гэж нэрлэгддэг эсрэгбие нь эсрэгтөрөгчтэй тусгайлан холбогддог гликопротейн юм.
 
Уламжлалт эсрэгбиеийн бэлдмэлийг амьтдыг дархлаажуулах, цусны ийлдэс цуглуулах замаар үйлдвэрлэдэг.Тиймээс антисерум нь ихэвчлэн ийлдэс дэх бусад хамааралгүй эсрэгтөрөгч болон бусад уургийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн эсрэг эсрэгбие агуулдаг.Ерөнхий антиген молекулууд нь ихэвчлэн олон янзын эпитоп агуулдаг тул ердийн эсрэгбие нь олон янзын эпитопын эсрэг эсрэгбиемүүдийн холимог юм.Ижил эпитопын эсрэг чиглэсэн сийвэнгийн ердийн эсрэгбиемүүд ч гэсэн өөр өөр В эсийн клоноор үүсгэгдсэн гетероген эсрэгбиемүүдээс бүрддэг.Тиймээс сийвэнгийн ердийн эсрэгбиемүүдийг поликлональ эсрэгбие буюу товчилбол поликлональ эсрэгбие гэж нэрлэдэг.
 
Моноклональ эсрэгбие (моноклональ эсрэгбие) нь нэг В эсийн клоноор үүсгэгдсэн, зөвхөн тодорхой эпитопын эсрэг чиглэсэн өндөр жигд эсрэгбие юм.Энэ нь ихэвчлэн гибридома технологиор бэлтгэгддэг—гибридомын эсрэгбиеийн технологи нь эсийн нэгдлийн технологи дээр суурилж, В эсийг өвөрмөц эсрэгбие ялгаруулах чадвартай, миелома эсийг хязгааргүй өсөлтийн хүчин чадалтай В эсийн гибридома болгон нэгтгэдэг.Энэхүү эрлийз эс нь эх эсийн шинж чанартай байдаг.Энэ нь миелома эсүүд шиг in vitro хязгааргүй, үхэшгүй үржиж, дэлүүний лимфоцит гэх мэт өвөрмөц эсрэгбиемүүдийг нэгтгэж, ялгаруулж чаддаг.Клончлох замаар нэг эрлийз эсээс гаргаж авсан моноклональ шугам, өөрөөр хэлбэл эрлийз эсийн шугамыг гаргаж авах боломжтой.Түүний үүсгэсэн эсрэгбие нь ижил антиген тодорхойлогч, өөрөөр хэлбэл моноклональ эсрэгбиемүүдийн эсрэг маш нэгэн төрлийн эсрэгбие юм.
 
Эсрэгбие нь нэг буюу хэд хэдэн Y хэлбэрийн мономер (жишээлбэл, моноклональ эсрэгбие эсвэл поликлональ эсрэгбие) хэлбэрээр байдаг.Y хэлбэрийн мономер бүр нь хоёр ижил хүнд гинж, хоёр ижил хөнгөн гинж зэрэг 4 полипептидийн гинжээс бүрдэнэ.Хөнгөн гинж ба хүнд гинжийг молекулын жингээр нь нэрлэнэ.Y хэлбэрийн бүтцийн дээд хэсэг нь хувьсах бүс бөгөөд энэ нь эсрэгтөрөгчийг холбох газар юм.(Дэлгэрэнгүй био-моноклональ эсрэгбиеийн үзэл баримтлалаас ишлэл)
 
Эсрэгбиеийн бүтэц
1Хүнд гинж
α, δ, ε, γ, μ гэсэн Грек үсгээр нэрлэгдсэн таван төрлийн хөхтөн амьтдын Ig хүнд гинж байдаг.Харгалзах эсрэгбиемүүдийг IgA, IgD, IgE, IgG, IgM гэж нэрлэдэг.Төрөл бүрийн хүнд гинж нь хэмжээ, найрлагаараа ялгаатай байдаг.α ба γ нь ойролцоогоор 450 амин хүчил агуулдаг бол μ ба ε нь ойролцоогоор 550 амин хүчлийг агуулдаг.
Хүнд гинж бүр нь тогтмол бүс ба хувьсах бүс гэсэн хоёр бүстэй.Нэг төрлийн бүх эсрэгбие нь ижил тогтмол бүстэй байдаг боловч өөр өөр төрлийн эсрэгбиемүүдийн хооронд ялгаа байдаг.Хүнд гинжин хэлхээний тогтмол бүсүүд γ, α, δ нь уялдаа холбоотой гурван Ig домайнаас бүрдэх ба уян хатан байдлыг нэмэгдүүлэх нугасны мужтай;хүнд гинжин хэлхээний тогтмол мужууд μ ба ε нь 4 Ig домайнаас бүрдэнэ.Өөр өөр В эсээс үүссэн эсрэгбиеийн хүнд гинжин хэлхээний хувьсах бүс нь өөр боловч ижил В эс эсвэл эсийн клоноор үүсгэгдсэн эсрэгбиеийн хувьсах бүс нь ижил бөгөөд хүнд гинж бүрийн хувьсах бүс нь 110 орчим амин хүчлийн урттай байдаг., Мөн нэг Ig домэйн үүсгэнэ.
 
Хөнгөн гинж
Хөхтөн амьтдад зөвхөн хоёр төрлийн хөнгөн гинж байдаг: ламбда төрөл ба каппа төрөл.Хөнгөн гинж бүр нь тогтмол бүс ба хувьсах бүс гэсэн хоёр холбогдсон домэйнтэй.Хөнгөн гинжин хэлхээний урт нь ойролцоогоор 211 ~ 217 амин хүчлүүд юм.Эсрэгбие бүрт агуулагдах хоёр хөнгөн гинж нь үргэлж ижил байдаг.Хөхтөн амьтдын хувьд эсрэгбие бүрийн гэрлийн гинж нь каппа эсвэл ламбда гэсэн зөвхөн нэг төрөлтэй байдаг.Мөгөөрсний загас (мөгөөрсний загас) ба яст загас зэрэг зарим доод сээр нуруутан амьтдад иота (иота) төрөл гэх мэт хөнгөн гинжний бусад төрлүүд бас байдаг.
 
Fab болон Fc сегментүүд
Fc сегментийг фермент эсвэл флюресцент будагч бодисуудтай шууд нэгтгэж, эсрэгбиемүүдийг тэмдэглэж болно.Энэ нь ELISA үйл явцын үед эсрэгбие хавтан дээр бэхлэгддэг хэсэг бөгөөд мөн дархлааны тунадасжилт, иммуноблотинг, иммуногистохимийн шинжилгээнд хоёр дахь эсрэгбиемийг таньж, холбож өгдөг хэсэг юм.Эсрэгбие нь папаин зэрэг протеолитик ферментийн нөлөөгөөр хоёр F(ab) сегмент болон нэг Fc сегмент болж гидролиз болж эсвэл нугасны хэсгээс пепсинээр задарч, нэг F(ab)2 сегмент ба нэг Fc сегмент болж гидролиз болж болно.IgG эсрэгбиеийн хэсгүүд нь заримдаа маш их хэрэгтэй байдаг.Fc сегмент байхгүй тул F(ab) сегмент нь эсрэгтөрөгчтэй хамт тунадасжихгүй, мөн in vivo судалгаанд дархлааны эсүүдэд баригдахгүй.Молекулын жижиг хэсгүүд, хөндлөн холбоосын үйл ажиллагаа байхгүй тул (Fc сегмент байхгүйгээс) Fab сегментийг функциональ судалгаанд ихэвчлэн цацрагаар тэмдэглэгээ хийхэд ашигладаг бөгөөд Fc сегментийг гистохимийн будалтанд голчлон блоклодог бодис болгон ашигладаг.
 
Хувьсах ба тогтмол бүс нутаг
Хувьсах бүс (V муж) нь N-төгсгөлийн ойролцоо H гинжин хэлхээний 1/5 эсвэл 1/4 (ойролцоогоор 118 амин хүчлийн үлдэгдэл агуулсан) болон L гинжний N төгсгөлийн ойролцоо 1/2 (ойролцоогоор 108-111 амин хүчлийн үлдэгдэл агуулсан) байрладаг.V бүс бүр нь гинжин хэлхээний дисульфидын холбооноос үүссэн пептидийн цагирагтай бөгөөд пептидийн цагираг бүр ойролцоогоор 67-75 амин хүчлийн үлдэгдэл агуулдаг.V бүс дэх амин хүчлүүдийн бүтэц, зохион байгуулалт нь эсрэгбиеийн эсрэгтөрөгчийг холбох өвөрмөц байдлыг тодорхойлдог.V бүс дэх амин хүчлүүдийн төрөл, дараалал байнга өөрчлөгддөг тул өөр өөр холбох эсрэгтөрөгчийн өвөрмөц шинж чанартай олон төрлийн эсрэгбие үүсдэг.L болон H гинжин хэлхээний V бүсүүдийг VL ба VH гэж нэрлэдэг.VL ба VH-д амин хүчлийн найрлага, орон нутгийн зарим бүс нутгийн дараалал нь илүү их хэлбэлзэлтэй байдаг.Эдгээр мужуудыг hypervariable regions (HVR) гэж нэрлэдэг.V бүс дэх HVR бус хэсгүүдийн амин хүчлийн найрлага, зохион байгуулалт нь харьцангуй консерватив бөгөөд үүнийг хүрээ бүс гэж нэрлэдэг.VL-д ихэвчлэн амин хүчлийн үлдэгдэл 24-34, 89-97-д байрладаг гурван хэт хувьсах бүс байдаг.VL ба VH-ийн гурван HVR-ийг HVR1, HVR2 ба HVR3 гэж нэрлэдэг.Рентген туяаны болор дифракцийн судалгаа, дүн шинжилгээ нь хэт хувьсах бүс нь эсрэгбиеийн эсрэгтөрөгчийг холбодог газар гэдгийг нотолсон тул үүнийг нэмэлтээр тодорхойлох бүс (CDR) гэж нэрлэдэг.VL ба VH-ийн HVR1, HVR2 ба HVR3-ийг тус тус CDR1, CDR2, CDR3 гэж нэрлэж болно.Ерөнхийдөө CDR3 нь хэт их хувьсах чадвартай байдаг.Хэт хувьсах бүс нь мөн Ig молекулуудын идиотип тодорхойлогч хүчин зүйлүүд байдаг гол байршил юм.Ихэнх тохиолдолд H гинж нь эсрэгтөрөгчтэй холбогдоход илүү чухал үүрэг гүйцэтгэдэг.
2Тогтмол бүс (C бүс)нь C төгсгөлийн ойролцоо H гинжин хэлхээний 3/4 эсвэл 4/5 (ойролцоогоор 119-р амин хүчлээс С терминал хүртэл), L гинжин хэлхээний С төгсгөлийн ойролцоо 1/2 (ойролцоогоор 105 амин хүчлийн үлдэгдэл агуулсан) байрладаг.H гинжин хэлхээний функциональ хэсэг бүр нь 110 орчим амин хүчлийн үлдэгдэл агуулдаг ба дисульфидын холбоогоор холбогдсон 50-60 амин хүчлийн үлдэгдэлээс бүрдсэн пептидийн цагираг агуулдаг.Энэ бүсийн амин хүчлийн найрлага, зохион байгуулалт нь ижил амьтны Ig изотип L гинж ба ижил төрлийн H гинжин хэлхээнд харьцангуй тогтмол байдаг.Үүнтэй адилаар энэ нь зөвхөн харгалзах эсрэгтөрөгчтэй холбогдож чаддаг боловч түүний С бүсийн бүтэц нь ижил, өөрөөр хэлбэл ижил эсрэгтөрөгчтэй байдаг.Морины эсрэг хүний ​​IgG хоёрдогч эсрэгбие (эсвэл эсрэгбие) нь янз бүрийн экзотоксины эсрэг хоёр эсрэгбие (IgG)-тай хослуулж болно.Энэ нь хоёрдогч эсрэгбие бэлтгэх, флюресцин, изотоп, фермент болон бусад шошготой эсрэгбиемүүдийг хэрэглэхэд чухал үндэс суурь болдог.
 
 
Холбоотой бүтээгдэхүүн:
Cell Direct RT-qPCR хэрэгсэл

 

 


Шуудангийн цаг: 2021 оны 9-р сарын 30-ны хооронд