A260/A230-ийн бага харьцаа нь ихэвчлэн 230 нм-ийн хамгийн их шингээлтийн долгионы урттай хольцоос үүсдэг.Эдгээр хольцууд юу болохыг харцгаая.

• Нийтлэг бохирдуулагч бодисууд	Шингээх долгионы урт	Харьцааны нөлөө
  Уураг	~230нм ба 280нм	А-ыг нэгэн зэрэг бууруулах260/A 280болон А260/A 280харьцаа
  Гуанидины давс	220-240 нм	А-г багасгах260/A 280харьцаа
  Фенол	~270нм	-
  Тризол	~230нм ба 270нм	А-г багасгах260/A 280харьцаа
  EDTA	~230нм	А-г багасгах260/A 280харьцаа
  Этанол	230-240 нм	А-г багасгах260/A 280харьцаа

 
 
 
Нийтлэг бохирдуулагчийн шингээлтийн долгионы урт ба тодосгогч утга

Pротеины бохирдол
Уургийн бохирдлыг нуклейн хүчлийг ялгах үйл явцын хамгийн түгээмэл бохирдол гэж үзэж болно.Уураг нь дээд усан фаз ба доод хэсгийн хооронд байдагорганикүе шат.Бохирдол нь A260/A280 ба A260/A230-ийн харьцааг нэгэн зэрэг бууруулж, A260/A230-ын харьцаа A260/A280-ийн харьцаанаас илүү тодорхой өөрчлөгдөх болно.
Дараагийн үедурвуу транскрипциor qPCR урвалууд, уургийн үлдэгдэл нь ферментийн үйл ажиллагааг дарангуйлж эсвэл саатуулж болно.Уургийн бохирдлоос сэргийлэх хамгийн сайн арга бол дээд давхаргыг сорохдоо "илүү биш, бага хэмжээгээр олон удаа" гэсэн зарчмыг санаж байх явдал юм.

2. Гуанидиний бохирдол
гидрохлорид (GuHCl) ба гуанидин тиоцианат (GTC) нь уургийг денатуратжуулах үйлчилгээтэй бөгөөд энэ нь нуклейн хүчлийг гаргаж авах явцад эсийн мембраныг хурдан устгаж, уургийн денатураци, хур тунадас үүсгэдэг.GuHCl ба GTC-ийн шингээлтийн долгионы урт нь 220-240 нм бөгөөдүлдэгдэл гуанидиний давс нь A260/A230-ийн харьцааг бууруулна.Хэдийгээр үлдэгдэл гуанидиний давс нь харьцааг бууруулдаг.доод урсгалын туршилтуудад үзүүлэх нөлөө нь үнэндээ өчүүхэн юм.

3. Тризолын бохирдол
Trizol-ийн гол бүрэлдэхүүн хэсэг нь фенол юм.Фенолын гол үүрэг нь эсийг задлах, эсэд уураг, нуклейн хүчлийн бодисыг ялгаруулах явдал юм.Фенол нь уургийг үр дүнтэй денатуратлаж чаддаг ч RNase-ийн идэвхийг бүрэн саатуулж чадахгүй.Тиймээс эндоген болон экзоген RNase-ийг дарангуйлахын тулд 8-гидроксихинолин, гуанидин изотиоцианат, β-меркаптоэтанол гэх мэтийг TRIzol-д нэмнэ.
Тризол нь эсийн РНХ-г гаргаж авахдаа эсийг хурдан задлах ба эсээс ялгарах нуклеазыг дарангуйлах ба үлдэгдэл Тризол нь A260/A230-ийн харьцааг мэдэгдэхүйц бууруулна.
Боловсруулах арга: Центрифуг хийхдээ Тризол дахь фенол нь 4° ба өрөөний температурт усны фазад амархан уусдаг гэдгийг анхаарах хэрэгтэй.

4. Этанолын үлдэгдэл
Этанол нь ДНХ-тэй холбогдож болзошгүй давсны ионуудыг уусгах явцад ДНХ-ийг тунадасжуулахад ашигладаг.Хамгийн их шингээлтийн долгионы уртшингээлтийн оргилэтанол нь мөн 230-240 нм байдаг бөгөөд энэ ньмөн A260/A230 харьцааг бууруулна.
Этанолын үлдэгдлээс зайлсхийх аргыг эцсийн шүүрлийн явцад хоёр удаа давтаж болноутааны бүрээсЭтанолыг бүрэн ууршуулахын тулд хоёр минут байлгана.
Гэсэн хэдий ч энэ харьцаа нь зөвхөн РНХ-ийн чанарын үнэлгээний индекс гэдгийг мэдэж байх ёстой.Хэрэв дээр дурьдсан үйлдлүүдийг хатуу зохицуулбал харьцаа ба стандарт муж хоорондын хазайлт нь доод урсгалын туршилтуудад тийм ч их нөлөө үзүүлэхгүй.
Холбоотой бүтээгдэхүүн:
Амьтны нийт РНХ тусгаарлах хэрэгсэл
Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах иж бүрдэл
Эсийн нийт РНХ тусгаарлах хэрэгсэл
Ургамлын нийт РНХ тусгаарлах иж бүрдэл Plus