Цусны РНХ тусгаарлах хэрэгсэл
Багцын тодорхойлолт:
Cat.NoRE-04011/04013
Бүтэн цуснаас РНХ-ийг цэвэршүүлэхэд 104 ≤ Цусны цагаан эс ≤ 107
Цусны РНХ-ийг цагаан эсээс хурдан ялгаж, цэвэршүүлнэ.
-РНХ-ийн доройтолд санаа зовох хэрэггүй.Бүхэл бүтэн багц нь RNase-гүй
-Энгийн—бүх үйлдлийг тасалгааны температурт гүйцэтгэдэг
-Хурдан—20 минутын дотор үйл ажиллагааг дуусгах боломжтой
-РНХ-ийн өндөр гарц: Зөвхөн РНХ багана ба өвөрмөц томъёо нь РНХ-г үр дүнтэй цэвэршүүлдэг.
-Аюулгүй-органик урвалж ашиглаагүй
-Дээж боловсруулах том хүчин чадал - 200 мкл хүртэлх дээжийг нэг удаад боловсруулах боломжтой.
-Өндөр чанар—цэвэршүүлсэн РНХ нь маш цэвэр, уураг болон бусад хольцгүй бөгөөд янз бүрийн туршилтын хэрэглээг хангах боломжтой.
Тодорхойлолт
Энэхүү иж бүрдэл нь манай компанийн боловсруулсан ээрэх багана, томъёог ашигладаг бөгөөд цусны бүлэгнэлтийн эсрэг үйлчилгээтэй бүхэл цуснаас өндөр цэвэршилттэй, өндөр чанартай нийт РНХ-ийг үр дүнтэй гаргаж авах боломжтой.Энэхүү иж бүрдэл нь цусны улаан эсийг хурдан бөгөөд үр дүнтэй задлах, цусны цагаан эсийг хадгалах чадвартай улаан эсийн лизат (Buffer RCL) өгдөг.Үр дүнтэй ДНХ-Цэвэрлэгчдийн колонм нь супернатант болон эсийн лизатыг хялбархан салгаж, геномын ДНХ-г шингээж, устгаж чаддаг.Үйл ажиллагаа нь энгийн бөгөөд цаг хугацаа хэмнэдэг;Зөвхөн РНХ агуулсан багана нь РНХ-г үр дүнтэй холбож чаддаг бөгөөд өвөрмөц томъёогоор олон тооны дээжийг нэгэн зэрэг боловсруулж чаддаг.
Бүхэл бүтэн систем RNase-Free нь олборлосон РНХ-г задрахгүй болгодог;Buffer RW1 ба Buffer RW2 буфер угаах систем нь олж авсан РНХ-г уураг, ДНХ, ион, органик нэгдлүүдийн бохирдлоос ангид болгодог.
Багцын агуулга
| Цусны нийт РНХ тусгаарлах хэрэгсэл | ||
| Багцын найрлага | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 удаа | 200 удаа | |
| RCL буфер (10×) | 52.5 мл | 210 мл |
| Буфер BRL1* | 30 мл | 120 мл |
| BRL2 буфер | 18 мл | 66 мл |
| RW1 буфер* | 25 мл | 100 мл |
| RW2 буфер | 24 мл | 96 мл |
| RNase-гүй ddH2 O | 10 мл | 40 мл |
| Зөвхөн РНХ багана | 50 багц | 200 багц |
| ДНХ цэвэрлэх багана | 50 багц | 200 багц |
| гарын авлага | 1 хувь | 1 хувь |
Онцлог, давуу тал
-РНХ-ийн доройтолд санаа зовох хэрэггүй.Бүхэл бүтэн багц нь RNase-гүй.
-Энгийн—бүх үйлдлийг тасалгааны температурт гүйцэтгэдэг.
-Хурдан—20 минутын дотор үйл ажиллагааг дуусгах боломжтой.
-РНХ-ийн өндөр гарц: Зөвхөн РНХ агуулсан багана ба өвөрмөц томъёо нь РНХ-г үр дүнтэй цэвэршүүлдэг.
-Аюулгүй-органик урвалж ашиглаагүй.
-Дээж боловсруулах том хүчин чадал - 200 мкл хүртэлх дээжийг нэг удаад боловсруулах боломжтой.
-Өндөр чанар—цэвэршүүлсэн РНХ нь маш цэвэр, уураг болон бусад хольцгүй бөгөөд янз бүрийн туршилтын хэрэглээг хангах боломжтой.
Багцын параметрүүд
Багцын хэрэглээ:
Энэ нь хөхтөн амьтдын бүх цуснаас нийт РНХ-г гаргаж авах, цэвэршүүлэхэд тохиромжтой.
Ажлын урсгал
Хадгалах нөхцөл
RCL (10×) буферийг 2-8 ℃ хэмд хадгалах ёстой;багцын бусад бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг өрөөний температурт (15-25 ℃) хуурай нөхцөлд, 12 сарын турш хадгалах боломжтой.BRL1 буферийг β-меркаптоэтанол (заавал биш) нэмсний дараа 1 сарын турш 4 ℃ температурт хадгалж болно.
Анхаарна уу: Хэрэв бага температурт хадгалвал уусмал нь хур тунадас унадаг.Хэрэглэхийн өмнө уусмалыг тасалгааны температурт хэсэг хугацаанд иж бүрдэлд хийнэ.Шаардлагатай бол тунадасыг уусгахын тулд 37 хэмийн усан ваннд 10 минутын турш урьдчилан халаагаад хэрэглэхийн өмнө сайтар холино.
Асуудлыг шинжлэхэд зориулсан гарын авлага
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
РНХ гаргаж авах боломжгүй эсвэл нуклейн хүчлийн гарц бага байна
Дээжийн РНХ-ийн агууламж, үйл ажиллагааны арга, шингэний хэмжээ гэх мэт нөхөн сэргээх үр ашигт нөлөөлдөг олон хүчин зүйл байдаг.
Нийтлэг шалтгаануудын шинжилгээ:
1. Ашиглалтын явцад мөсөн банн эсвэл бага температурт (4 ° C) центрифуг хийх.
Зөвлөмж: Өрөөний температурт (15-25 ° C) ажиллах, хэзээ ч мөсөн банн, бага температурт центрифуг хийхгүй.
2. Дээжийг буруу хадгалах эсвэл дээжийг хэт удаан хадгалах.
Зөвлөмж: Дээжийг -80 хэмд хадгалах эсвэл шингэн азотод хөлдөөх, хөлдөөх гэсгээх аргыг олон удаа хэрэглэхээс зайлсхийх;шинэхэн цуглуулсан дээжийг РНХ олборлоход ашиглахыг хичээ.
3.Дээжний задрал хангалтгүй
Зөвлөмж: Дээж ба ажлын уусмалыг (шугаман акриламид) сайтар хольж, тасалгааны температурт (15-25 ° C) 10 минутын турш өсгөвөрлөсөн эсэхийг шалгана уу.
4.Улгагчийг буруу нэмсэн
Зөвлөмж: RNase-Free ddH2O-г цэвэршүүлэх баганын мембраны дунд хэсэгт нэмсэн эсэхийг шалгаарай.
5. Buffer viRW2 дахь усгүй этилийн спиртийн буруу эзэлхүүн
Зөвлөмж: Зааврыг дагаж, иж бүрдлийг хэрэглэхийн өмнө viRW2 буферт усгүй этилийн спиртийн хэмжээг зөв нэмээд сайтар холино уу.
6.Зохисгүй дээжийн хэрэглээ.
Зөвлөмж: 500μl буфер viRL тутамд 200μл дээж.Хэт их дээжийн хэмжээ нь РНХ олборлох хурдыг бууруулахад хүргэдэг.
7.Буруу шүүрэлтийн хэмжээ эсвэл бүрэн бус шүүрэл.
Зөвлөмж: Цэвэршүүлэх баганын элюентийн хэмжээ 30-50μl;Хэрэв шүүрэлтийн үр дүн хангалтгүй байвал урьдчилан халаасан RNase-Free ddH нэмэхийг зөвлөж байна.2O ба тасалгааны температурт байрлуулах хугацааг уртасгах, тухайлбал 5-10мин
8.Цэвэршүүлэх баганад buffer viRW2-д зайлж угаасны дараа этанолын үлдэгдэл байна.
Зөвлөмж: Хэрэв viRW2 буферт зайлж, 2 минутын турш хоосон хуруу шилэнд центрифуг хийсний дараа этилийн спирт хэвээр байвал үлдсэн этилийн спиртийг бүрэн арилгахын тулд цэвэршүүлэх баганыг хоосон хоолойд центрифуг хийсний дараа тасалгааны температурт 5 минутын турш үлдээж болно.
Цэвэршүүлсэн РНХ молекулын задрал
Цэвэршүүлсэн РНХ-ийн чанар нь дээж хадгалах, RNase-ийн бохирдол, үйл ажиллагаа зэрэг хүчин зүйлээс хамаарна.
Нийтлэг шалтгаануудын шинжилгээ:
1.Цуглуулсан дээжийг хугацаанд нь хадгалаагүй.
Зөвлөмж: Хэрэв дээжийг цуглуулсны дараа цаг тухайд нь ашиглаагүй бол -80 ℃ эсвэл шингэн азотын температурт нэн даруй хадгална уу.РНХ молекулыг гаргаж авахын тулд боломжтой бол шинээр цуглуулсан дээжийг ашиглахыг хичээ.
2.Цуглуулсан дээжийг удаа дараа хөлдөөж, гэсгээж байна.
Зөвлөмж: Дээж цуглуулах, хадгалах явцад олон удаа хөлдөөх, гэсгээхээс (нэгээс илүүгүй) зайлсхий, эс тэгвээс нуклейн хүчлийн гарц буурна.
3.Хагалгааны өрөөнд RNase-ийг нэвтрүүлсэн эсвэл нэг удаагийн бээлий, маск гэх мэт зүйл хэрэглээгүй.
Зөвлөмж: РНХ-ийн молекулыг задлах туршилтыг РНХ-ийн тусдаа хагалгааны өрөөнд хийх нь хамгийн сайн арга бөгөөд туршилтын өмнө туршилтын хүснэгтийг цэвэрлэнэ.Туршилтын явцад RNase-ийн нөлөөгөөр РНХ-ийн задралаас зайлсхийхийн тулд нэг удаагийн бээлий, маск өмс.
4. Ашиглалтын явцад урвалж RNase-ээр бохирдсон байна.
Зөвлөмж: Холбогдох туршилтуудад зориулж шинэ вирусын РНХ тусгаарлах иж бүрдэлээр солино уу.
5. Центрифугийн хоолой, пипеткийн үзүүр гэх мэт RNase-ийн бохирдол. Зөвлөмж: Центрифугийн хоолой, пипеткийн үзүүр, пипеткүүд бүгд RNase-гүй эсэхийг шалгаарай.
Цэвэршүүлсэн РНХ молекулууд нь доод урсгалын туршилтуудад нөлөөлсөн
Цэвэршүүлэх баганаар цэвэршүүлсэн РНХ молекулууд нь хэт их давсны ион эсвэл уураг байгаа тохиолдолд урвуу транскрипц, Northern Blot гэх мэт туршилтуудад нөлөөлнө.
1.Шилсэн РНХ молекулуудад давсны ионууд үлддэг.
Зөвлөмж: ViRW2 буферт усгүй этилийн спиртийн хэмжээг зөв нэмсэн эсэхийг шалгаад, ашиглалтын зааварт заасан центрифугийн зөв хурдны дагуу цэвэршүүлэх баганыг хоёр удаа угаана. Хэрэв давсны ионууд үлдсэн хэвээр байвал цэвэршүүлэх баганад Buffer viRW2 нэмж, тасалгааны температурт 5 минут байлгана.Дараа нь давсны ионы бохирдлыг хамгийн их хэмжээгээр арилгахын тулд центрифуг хийнэ
2.Шилсэн РНХ молекулуудад этилийн спирт үлдэнэ
Зөвлөмж: Цэвэршүүлэх баганыг viRW2 буферээр угаасан болохыг баталгаажуулсны дараа ашиглалтын зааварт заасан төвөөс зугтах хурдны дагуу хоосон хоолойн центрифуг хийнэ.Хэрэв этанол үлдсэн бол хоосон хоолойд центрифуг хийсний дараа тасалгааны температурт 5 минут байлгаж, үлдсэн этилийн спиртийг хамгийн их хэмжээгээр зайлуулж болно.
Зааварчилгааны гарын авлага:
Вирусын РНХ тусгаарлах иж бүрдэл зааварчилгаа
