2019 оны шинэ вирусын (ORF1ab, N ген) БНХАУ-ын Rt ПГУ-ын шинжилгээний урвалж.
Үйлчлүүлэгчдийнхээ бүх шаардлагыг хангах үүргээ бүрэн биелүүлэх;худалдан авагчдынхаа хөгжлийг сурталчлах замаар тогтвортой ахиц дэвшилд хүрэх;2019 оны шинэ вирус (ORF1ab, N ген)-д зориулсан Хятадын Rt ПГУ-ын шинжилгээний урвалжийг үйлдвэрийн эх үүсвэрээр дамжуулан үйлчлүүлэгчдийн байнгын хамтын ажиллагааны эцсийн түнш болж, үйлчлүүлэгчдийн ашиг сонирхлыг дээд зэргээр нэмэгдүүлэхийн тулд бид боломжит хугацаандаа гайхалтай амжилтуудыг бий болгоно гэдэгт итгэлтэй байна.Бид таны хамгийн найдвартай ханган нийлүүлэгчдийн нэг болохыг тэсэн ядан хүлээж байна.
Үйлчлүүлэгчдийнхээ бүх шаардлагыг хангах үүргээ бүрэн биелүүлэх;худалдан авагчдынхаа хөгжлийг сурталчлах замаар тогтвортой ахиц дэвшилд хүрэх;Үйлчлүүлэгчдийн байнгын хамтын ажиллагааны эцсийн түнш болж өргөжин, үйлчлүүлэгчдийн ашиг сонирхлыг дээд зэргээр нэмэгдүүлэхХятадын ПГУ-ын багц, PCr илрүүлэх хэрэгсэл, Цаашид бид цаг үетэйгээ хөл нийлүүлэн алхаж, шинэ бүтээгдэхүүнүүдийг үргэлжлүүлэн бүтээх болно.Хүчирхэг судалгааны баг, дэвшилтэт үйлдвэрлэлийн хүчин чадал, шинжлэх ухааны менежмент, шилдэг үйлчилгээгээрээ бид дэлхий даяарх хэрэглэгчиддээ өндөр чанартай бүтээгдэхүүн нийлүүлэх болно.Бид та бүхнийг харилцан ашигтай бизнесийн түнш байхыг чин сэтгэлээсээ урьж байна.
Тодорхойлолт
Энэхүү иж бүрдэл нь RT-qPCR урвалд зориулж өсгөвөрлөсөн эсийн дээжээс РНХ-ийг хурдан гаргаж чаддаг өвөрмөц лизисын буфер системийг ашигладаг бөгөөд ингэснээр цаг хугацаа шаардсан, хөдөлмөр их шаарддаг РНХ цэвэршүүлэх процессыг арилгадаг.РНХ-ийн загварыг ердөө 7 минутын дотор авах боломжтой.Иж бүрдэлд нийлүүлсэн 5×Direct RT Mix болон 2×Direct qPCR Mix-SYBR урвалжууд нь ПГУ-ын бодит цагийн тоон үр дүнг хурдан бөгөөд үр дүнтэй авах боломжтой.
5×Direct RT Mix ба 2×Direct qPCR Mix-SYBR нь дарангуйлагчийг тэсвэрлэх чадвартай бөгөөд дээжийн лизатыг шууд RT-qPCR-д загвар болгон ашиглаж болно.Энэхүү иж бүрдэл нь өвөрмөц РНХ-ийн өндөр хамааралтай Foregene урвуу транскриптаза, халуун D-Taq ДНХ полимераз, dNTPs, MgCl агуулдаг.2, урвалын буфер, ПГУ-ын оновчтой, тогтворжуулагч.
Үзүүлэлтүүд
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Иж бүрдэл хэсгүүд
I хэсэг | Буфер CL |
Foregene Protease Plus II | |
буфер ST | |
II хэсэг | ДНХ баллуур |
5 × Шууд RT Mix | |
2× Шууд qPCR Mix-SYBR | |
50 × ROX лавлагаа будаг | |
RNase-гүй ddH2O | |
Зааварчилгаа |
Онцлог, давуу тал
■ Энгийн бөгөөд үр дүнтэй: Cell Direct RT технологийн тусламжтайгаар РНХ-ийн дээжийг ердөө 7 минутын дотор авах боломжтой.
■ Түүврийн эрэлт бага, 10 хүртэлх нүдийг турших боломжтой.
■ Өндөр нэвтрүүлэх чадвар: 384, 96, 24, 12, 6 цооногийн ялтсуудад өсгөвөрлөсөн эсүүдийн РНХ-ийг хурдан илрүүлдэг.
■ ДНХ баллуур нь суллагдсан геномыг хурдан устгаж, дараагийн туршилтын үр дүнд үзүүлэх нөлөөллийг эрс багасгадаг.
■ Оновчтой RT ба qPCR систем нь хоёр үе шаттай RT-PCR урвуу транскрипцийг илүү үр дүнтэй, ПГУ-ыг илүү тодорхой болгож, RT-qPCR урвалын дарангуйлагчдад илүү тэсвэртэй болгодог.
Иж бүрдэл програм
Хэрэглэх хүрээ: өсгөвөрлөсөн эсүүд.
- Дээж задралаар ялгарсан РНХ: зөвхөн энэ багцын RT-qPCR загварт хамаарна.
- Энэхүү иж бүрдлийг дараах зорилгоор ашиглаж болно: генийн экспрессийн шинжилгээ, siRNA-аар дамжсан генийг намжаах нөлөөг шалгах, эмийн скрининг гэх мэт.
Диаграм
Хадгалалт ба Хадгалах хугацаа
Энэ багцын I хэсгийг 4℃ хэмд хадгалах ёстой;II хэсгийг -20 хэмд хадгална.
Foregene Protease Plus II-ийг 4 хэмд, -20 хэмд хөлдөөж болохгүй.
Урвалж 2×Direct qPCR Mix-SYBR-ийг -20℃ температурт харанхуйд хадгална;Хэрэв байнга хэрэглэдэг бол 4℃ хэмд богино хугацаанд хадгалах боломжтой (10 хоногийн дотор ашиглах). Үйлчлүүлэгчдийнхээ бүх шаардлагыг бүрэн хангах;худалдан авагчдынхаа хөгжлийг сурталчлах замаар тогтвортой ахиц дэвшилд хүрэх;2019 оны шинэ вирус (ORF1ab, N ген)-д зориулсан Хятадын Rt ПГУ-ын шинжилгээний урвалжийг үйлдвэрийн эх үүсвэрээр дамжуулан үйлчлүүлэгчдийн байнгын хамтын ажиллагааны эцсийн түнш болж, үйлчлүүлэгчдийн ашиг сонирхлыг дээд зэргээр нэмэгдүүлэхийн тулд бид боломжит хугацаандаа гайхалтай амжилтуудыг бий болгоно гэдэгт итгэлтэй байна.Бид таны хамгийн найдвартай ханган нийлүүлэгчдийн нэг болохыг тэсэн ядан хүлээж байна.
Үйлдвэрийн эх үүсвэрХятадын ПГУ-ын багц, ПГУ-ын илрүүлэх хэрэгсэл, Урагшаа харж, бид цаг үетэйгээ хөл нийлүүлэн алхаж, шинэ бүтээгдэхүүнүүдийг үргэлжлүүлэн бүтээх болно.Хүчирхэг судалгааны баг, дэвшилтэт үйлдвэрлэлийн хүчин чадал, шинжлэх ухааны менежмент, шилдэг үйлчилгээгээрээ бид дэлхий даяарх хэрэглэгчиддээ өндөр чанартай бүтээгдэхүүн нийлүүлэх болно.Бид та бүхнийг харилцан ашигтай бизнесийн түнш байхыг чин сэтгэлээсээ урьж байна.
Бодит цагийн ПГУ-ын праймерын дизайны зарчим
Урагшаа праймер ба урвуу праймер
Бодит цагийн ПГУ-ын хувьд праймер дизайн маш чухал юм.Праймерууд нь ПГУ-ын олшруулалтын өвөрмөц байдал, үр дүнтэй холбоотой бөгөөд дараах зарчмуудыг үндэслэн боловсруулж болно.
Праймерын урт: 18-30bp.
GC агууламж: 40-60%.
Tm утга: Primer 5 гэх мэт праймер дизайны програм хангамж нь праймерын Tm утгыг өгч чадна.Урсгалын дээд ба доод талын праймеруудын Tm утгууд аль болох ойр байх ёстой.Tm-ийн тооцооллын томъёог мөн ашиглаж болно: Tm = 4 ° C (G + C) + 2 ° C (A + T).ПГУ-ыг хийхдээ праймерын Tm-ээс доош температурыг 5 ° C-аас бага температурыг ерөнхийд нь зөөлрүүлэх температур гэж сонгоно (засварлах температурын харгалзах өсөлт нь ПГУ-ын урвалын өвөрмөц байдлыг нэмэгдүүлдэг).
Праймер ба ПГУ-ын бүтээгдэхүүн:
Дизайн праймер ПГУ-ын олшруулалтын бүтээгдэхүүний урт нь 100-150bp байх нь дээр.
Загварын хоёрдогч бүтцийн хэсэгт дизайны праймераас аль болох зайлсхийх хэрэгтэй.
Урсгалын дээд ба доод талын праймеруудын 3′ төгсгөлийн хооронд 2 ба түүнээс дээш нэмэлт суурь үүсэхээс зайлсхий.
Праймер 3′ терминалын суурь нь нэмэлт 3 дараалсан G эсвэл C-тэй байж болохгүй.
Праймерууд өөрсдөө нэмэлт бүтэцтэй байж болохгүй, эс тэгвээс үсний хавчаар бүтэц үүсч, ПГУ-ын олшруулалтад нөлөөлнө.
ATCG-ийг праймерын дарааллаар аль болох жигд тарааж, 3′ терминалын суурийг T гэж үзэхээс зайлсхийх хэрэгтэй.
Хавсралт 1: Cell Direct RT-qPCR Kit бүрэлдэхүүн хэсгийн нэмэлт багц
1.Эсийн задралын уусмал
| |||
Иж бүрдэл хэсгүүд (24 худгийн задралын систем / худаг) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 Т | 500 Т | ||
ХэсэгI | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
буфер ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
ХэсэгII | ДНХ баллуур | 400 мкл | 1 мл × 2 |
2.RT Mix
| |
Иж бүрдэл хэсгүүд (20 мкл урвалын систем) | DRT-01011-B1 |
200 Т | |
5 × Шууд RT Mix | 800 мкл |
RNase-гүй ddH2O | 1.7 мл × 2 |
| ||
Иж бүрдэл хэсгүүд (20 мкл урвалын систем) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 Т | 1000 Т | |
2× Шууд qPCR Mix-SYBR | 1 мл × 2 | 1.7 мл × 6 |
50 × ROX лавлагаа будаг | 40 мкл | 200 мкл |
RNase-гүй ddH2O | 1.7 мл | 10 мл |