• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
хуудас_баннер

Foreasy HS Taq ДНХ Полимераз

Foreasy HS Taq ДНХ Полимеразын Онцлох зураг
  • Foreasy HS Taq ДНХ Полимераз

Багцын тодорхойлолт:

◮Өвөрмөц чанар: Халуун эхлэх өндөр идэвхжилтэй фермент.

◮Хурдан өсгөлт: 10 сек/кб.

◮Загварт дасан зохицох чадвар өндөр: Өндөрийг үр дүнтэй өсгөхийн тулд ашиглаж болноGCүнэ цэнэболонтөрөл бүрийн олшруулахад хэцүү ДНХ-ийн загвар.

◮Хүчтэй үнэнч: Үнэнч байдал нь 6 дахин ихof энгийн Taq фермент.

урд талын хүч


Бүтээгдэхүүний дэлгэрэнгүй

Бүтээгдэхүүний шошго

Түгээмэл асуултууд

Тодорхойлолт

Foreasy HS Taq ДНХ Полимераз нь генийн рекомбинацын технологиор Escherichia coli инженерийн бактериудад илэрхийлэгддэг шинэ Taq фермент юм.Ферментийг тусгай процессоор эмчилсний дараа энэ нь'Дулааны идэвхжүүлэлтээс өмнө идэвхижил нь дарангуйлагддаг бөгөөд ингэснээр бага температурт праймер эсвэл димерийн өвөрмөц бус задралын улмаас үүссэн өвөрмөц бус олшруулалтыг дарангуйлдаг.Энэ бүтээгдэхүүн нь өндөр өвөрмөц ПГУ-ын урвалд тохиромжтойион, M ultiple x ПГУ, өндөр GC агууламж (> 60%),хамтхоёрдогч бүтэцэсвэл бусадхүчтэй дэвсгэр геномicsолшруулалт ба том хэмжээний геномicsолшруулалтын илрүүлэлт.Фермент нь 5' → 3' ДНХ полимеразын идэвхжил, 5' → 3' экзонуклеазын идэвхжилтэй боловч 3' → 5' экзонуклеазын идэвхжилгүй.

Иж бүрдэл хэсгүүд

Бүрэлдэхүүн хэсэг IM-01021 IM-01022 IM-01023
Урьдчилан HS Taq ДНХ Полимераз (5 U/μL)  5000 U (1 мл)  50 КУ (10 мл)  500 КУ (100 мл)
2 × Taq урвалын буфер  25 мл × 5  250 мл × 5  500 мл × 25

Онцлог, давуу тал

- Өвөрмөц чанар: Халуун эхлэх өндөр идэвхжилтэй фермент.

- Хурдан өсгөлт: 10 сек/кб.

- Загварт дасан зохицох чадвар өндөр: Өндөрийг үр дүнтэй өсгөхийн тулд ашиглаж болноGCүнэ цэнэболонтөрөл бүрийн олшруулахад хэцүү ДНХ-ийн загвар.

- Хүчтэй үнэнч: Үнэнч байдал нь 6 удааof энгийн Taq фермент.

Иж бүрдэл програм

- Төрөл бүрийн ПГУ/qPCR систем ба шууд ПГУ-ын систем

- ПГУ-ын олшруулсан ДНХ-ийн фрагмент

- ДНХ тэмдэг

- ДНХ-ийн дараалал

- ПГУ нэмэх нь сүүл

Үйл ажиллагааны тодорхойлолт

1U: 10 нмоль агуулсан ферментийн хэмжээДНХхүчилд уусдаггүй бодис руу хулд загасны эр бэлгийн эсийн идэвхжүүлсэн ДНХ-г загвар/праймер болгон ашиглана, 74 °C, 30 минут.

Урвалын нөхцөл

Температур Урвалын хугацаа Циклийн цаг
37°C 5 мин 1
94°C 5 мин 1
94°C 10 сек  40
60°C 10 сек

Жич:10 мкл ба 20 мкл багтаамжтай системүүдийн хувьд дулааны мөчлөгт халаах таг байхгүй бол ижил хэмжээний эрдэс тос нэмнэ.

ПГУ-ын урвалын нөхцөл нь загвар, праймер гэх мэт бүтцийн нөхцлөөс хамаарч өөр өөр байдаг.Тодорхой үйл ажиллагааны хувьд загварын төрөл, зорилтот фрагментийн хэмжээ, олшруулсан фрагментийн үндсэн дараалал, праймерын GC агуулга, урт зэрэг тодорхой нөхцлүүдийн дагуу анивчих температур, сунгах хугацаа гэх мэт урвалын оновчтой нөхцлийг төлөвлөх шаардлагатай.

Хадгалах

-20 ± 5 ° C-д 2 жил эсвэл -80 ° C-д удаан хугацаагаар хадгална.

  • Өмнөх:
  • Дараачийн:

    • Олшруулах дохио байхгүй

    1. Иж бүрдэлд агуулагдах Taq DNA Polymerase нь буруу хадгалалт эсвэл хугацаа дууссаны улмаас үйл ажиллагаагаа алддаг.
    Зөвлөмж: Багцыг хадгалах нөхцлийг баталгаажуулах;ПГУ-ын системд зохих хэмжээний Taq ДНХ Полимеразыг дахин нэмэх эсвэл холбогдох туршилтуудад зориулж бодит цагийн ПГУ-ын шинэ хэрэгсэл худалдаж аваарай.

    2.ДНХ-ийн загварт Так ДНХ Полимеразын дарангуйлагч маш их байдаг.
    Зөвлөмж: Загварыг дахин цэвэршүүлэх эсвэл ашигласан загварын хэмжээг багасгах.

    3. Mg2+ концентраци нь тохиромжгүй.
    Зөвлөмж: Бидний санал болгож буй 2× Бодит ПГУ-ын хольцын Mg2+ концентраци нь 3.5 мм байна.Гэсэн хэдий ч зарим тусгай праймер болон загваруудын хувьд Mg2+ концентраци илүү өндөр байж болно.Тиймээс та Mg2+ концентрацийг оновчтой болгохын тулд MgCl2-ийг шууд нэмж болно.Оновчлолын хувьд Mg2+ 0.5mM-ийг нэмэгдүүлэхийг зөвлөж байна.

    4. ПГУ-ын олшруулах нөхцөл тохиромжгүй, праймерын дараалал эсвэл концентраци буруу байна.
    Зөвлөмж: праймерын дарааллын зөвийг баталгаажуулж, праймер нь муудаагүй;хэрэв олшруулалтын дохио сайн биш бол зөөлрүүлэх температурыг бууруулж, праймерын концентрацийг зохих ёсоор тохируулахыг хичээ.

    5.Загварын хэмжээ хэт бага эсвэл хэт их байна.
    Зөвлөмж: Загварыг шугаманжуулах градиент шингэрүүлэлт хийж, бодит цагийн ПГУ-ын туршилтанд хамгийн сайн ПГУ-ын нөлөө бүхий загварын концентрацийг сонго.

    NTC нь хэт өндөр флюресценцийн утгатай байна

    1.Ашиглалтын явцад үүссэн урвалжийн бохирдол.
    Зөвлөмж: Бодит цагийн ПГУ-ын туршилтын шинэ урвалжаар солих.

    2.ПГУ-ын урвалын системийг бэлтгэх явцад бохирдол үүссэн.
    Зөвлөмж: Ашиглалтын явцад шаардлагатай хамгаалалтын арга хэмжээ авах, тухайлбал: латекс бээлий өмсөх, шүүлтүүртэй пипеткийн үзүүр ашиглах гэх мэт.

    3.Праймерууд доройтож, праймеруудын доройтол нь өвөрмөц бус олшруулалтыг бий болгоно.
    Зөвлөмж: SDS-PAGE электрофорез ашиглан праймерууд доройтсон эсэхийг илрүүлж, бодит цагийн ПГУ-ын туршилтанд зориулж шинэ праймераар солино.

    Праймер димер буюу өвөрмөц бус олшруулалт

    1. Mg2+ концентраци нь тохиромжгүй.
    Зөвлөмж: Бидний санал болгож буй 2× Real PCR EasyTM Mix-ийн Mg2+ концентраци нь 3.5 мМ байна.Гэсэн хэдий ч зарим тусгай праймер болон загваруудын хувьд Mg2+ концентраци илүү өндөр байж болно.Тиймээс та Mg2+ концентрацийг оновчтой болгохын тулд MgCl2-ийг шууд нэмж болно.Оновчлолын хувьд Mg2+ 0.5mM-ийг нэмэгдүүлэхийг зөвлөж байна.

    2. ПГУ-ын температур хэт бага байна.
    Зөвлөмж: ПГУ-ын температурыг 1℃ эсвэл 2℃-аар нэмэгдүүлэх.

    3. ПГУ-ын бүтээгдэхүүн хэтэрхий урт байна.
    Зөвлөмж: Бодит цагийн ПГУ-ын бүтээгдэхүүний урт нь 100-150bp, 500bp-ээс ихгүй байх ёстой.

    4.Праймерууд доройтож, праймеруудын доройтол нь тодорхой олшруулалтын харагдах байдалд хүргэнэ.
    Зөвлөмж: SDS-PAGE электрофорез ашиглан праймерууд доройтсон эсэхийг илрүүлж, бодит цагийн ПГУ-ын туршилтанд зориулж шинэ праймераар солино.

    5. ПГУ-ын систем буруу, эсвэл систем нь хэтэрхий жижиг байна.
    Зөвлөмж: ПГУ-ын урвалын систем нь хэтэрхий жижиг нь илрүүлэх нарийвчлал буурахад хүргэдэг.Бодит цагийн ПГУ-ын туршилтыг дахин явуулахын тулд тоон ПГУ-ын багажийн санал болгосон урвалын системийг ашиглах нь хамгийн сайн арга юм.

    Тоон утгын давтагдах чадвар муу

    1. Багаж буруу ажиллаж байна.
    Зөвлөмж: Багажны ПГУ-ын нүх тус бүрийн хооронд алдаа гарч болзошгүй тул температурын удирдлага эсвэл илрүүлэх явцад давтагдах чадвар муу болно.Холбогдох хэрэгслийн зааврын дагуу шалгана уу.

    2. Дээжний цэвэр байдал сайн биш байна.
    Зөвлөмж: Цэвэр бус дээж нь загвар болон праймерын цэвэр байдлыг багтаасан туршилтын давтагдах чадвар муудахад хүргэдэг.Загварыг дахин цэвэршүүлэх нь хамгийн сайн арга бөгөөд праймеруудыг SDS-PAGE-ээр хамгийн сайн цэвэршүүлдэг.

    3. ПГУ-ын системийг бэлтгэх, хадгалах хугацаа хэт урт байна.
    Зөвлөмж: ПГУ-ын туршилтанд зориулж бодит цагийн ПГУ-ын системийг бэлтгэсний дараа шууд хэрэглээрэй, үүнийг удаан хугацаагаар орхиж болохгүй.

    4. ПГУ-ын олшруулах нөхцөл тохиромжгүй, праймерын дараалал эсвэл концентраци буруу байна.
    Зөвлөмж: праймерын дарааллын зөвийг баталгаажуулж, праймер нь муудаагүй;хэрэв олшруулалтын дохио сайн биш бол зөөлрүүлэх температурыг бууруулж, праймерын концентрацийг зохих ёсоор тохируулахыг хичээ.

    5. ПГУ-ын систем буруу, эсвэл систем нь хэтэрхий жижиг байна.
    Зөвлөмж: ПГУ-ын урвалын систем нь хэтэрхий жижиг нь илрүүлэх нарийвчлал буурахад хүргэдэг.Бодит цагийн ПГУ-ын туршилтыг дахин явуулахын тулд тоон ПГУ-ын багажийн санал болгосон урвалын системийг ашиглах нь хамгийн сайн арга юм.

    Энд мессежээ бичээд бидэнд илгээгээрэй

    ХолбоотойБүтээгдэхүүн

    Хайлт хийхийн тулд enter, хаахын тулд ESC товчийг дарна уу