EndoFree Maxi Plasmid Kit (Ээрэх багана)
Тодорхойлолт
EndoFree Maxi Plasmid Kit нь плазмидын ДНХ-ийг үр дүнтэй, тусгайлан холбох цахиурын мембран шингээх өвөрмөц аргыг ашигладаг.Тусгай Endotoxin Removal Buffer P4 болон EndoFree Maxi шүүлтүүр баганыг хослуулснаар эндотоксин, уураг болон бусад хольцыг үр дүнтэй арилгаж чадна.Бүх олборлолт нь ердөө 1 цаг зарцуулдаг бөгөөд энэ нь тохиромжтой, хурдан ажиллагааг хангадаг.
Практик тус бүрт санал болгож буй бактерийн хэмжээ: Өндөр хуулбартай плазмидын хувьд 100 мл нян өсгөвөрлөгч хэрэглэхийг зөвлөдөг ба түүнээс гарах гарц нь ерөнхийдөө 500-1500 мкг байна.Бага хуулбартай плазмидын хувьд 200-600 мкг плазмид үүсгэхийн тулд 200 мл бактери өсгөвөрлөхийг зөвлөж байна.
Иж бүрдэл хэсгүүд
Бүтээгдэхүүн Бүрэлдэхүүн хэсгүүд | D909-E(10 бэлтгэл) |
Буфер BL | 30 мл |
P1 буфер | 100 мл |
P2 буфер | 100 мл |
P4 буфер | 100 мл |
DW2 буфер | 44 мл |
Буфер EB | 30 мл |
RNase A (10 мг/мл) | 1 мл |
DNAPure Maxi Spin багана | 10 ширхэг |
FinePure Макси шүүлтүүр тариур | 10 ширхэг |
50 мл-ийн цуглуулгын хоолой | 10 ширхэг |
Плазмидын ДНХ-ийн концентраци ба цэвэршилтийг илрүүлэх
Олж авсан плазмидын ДНХ-ийн цэвэр байдал, концентрацийг агароз гель электрофорез болон хэт ягаан туяаны спектрофотометрээр илрүүлж болно.OD260-ийн 1 утга нь ойролцоогоор 50 мкг/мл давхар хэлхээтэй ДНХ-тэй тохирч байна.Цэвэршүүлсэн плазмидын ДНХ-ийн OD260/OD280 утга ерөнхийдөө 1.7-1.9 хооронд байна.Цэвэршүүлсэн плазмидын ДНХ-ийг эсийн трансфекци эсвэл in vivo туршилт гэх мэт өндөр цэвэршилттэй туршилтуудад шууд хэрэглэж болно.
Иж бүрдэл програм
Энэхүү иж бүрдэлээр гаргаж авсан плазмидын ДНХ-ийг ферментийн задрал, ПГУ, дараалал тогтоох, холбох, хувиргах, мөн төрөл бүрийн эсийн трансфекц зэрэг ердийн үйл ажиллагаанд ашиглаж болно.
Хадгалалт ба Хадгалах хугацаа
EndoFree Maxi Plasmid Kit-ийг өрөөний температурт (15-25°C) хуурай нөхцөлд 12 сар хүртэл хадгалах боломжтой.Эхний хэрэглээний өмнө RNase A-г буфер P1 дээр нэмээд сайтар хольж, 2-8°С-т хадгална.Хольцыг 6 сараас дээш хугацаагаар тогтвортой хадгалах боломжтой.