Lnc-RT Heroᵀᴹ I(gDNase-тай)(lncRNA-аас эхний хэлхээний cDNA нийлэгжилтэнд зориулсан Super Premix)
Үзүүлэлтүүд
25×20μл Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase-тай) нь геномын ДНХ-ийн бохирдлыг хурдан арилгах зорилгоор lncRNA-д зориулан тусгайлан бүтээсэн урвуу транскрипцийн систем юм.5×gDNase Mix нь РНХ-д үлдсэн геномыг 42°С-т 2 минутын турш хурдан устгаж, qPCR үр дүнд геномын хөндлөнгийн оролцооноос үр дүнтэйгээр зайлсхийдэг.
5×L-RT HeroTM Mix нь Foregene-ийн тусгайлан боловсруулсан Foregene LncRNA Урвуу транскриптазыг агуулдаг бөгөөд энэ нь lncRNA болон бусад урт РНХ-ийн цогц загваруудад тусгайлан зориулсан урвуу транскриптазын шинэ төрөл бөгөөд РНХ-ийн илүү хүчтэй хамаарал, урвуу бичлэгийн өндөр үр ашигтай.Оновчтой систем нь урвуу транскрипцийн хурдыг хурдасгаж, өндөр GC агуулгатай, нарийн төвөгтэй хоёрдогч бүтэцтэй РНХ загваруудыг хялбархан хуулж чаддаг.Эхний хэлхээний cDNA синтезийг 42 ° C-д 15 минутын дотор хийж болно.
Иж бүрдэл хэсгүүд
| 5× gDNase холимог |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-гүй ddH2O |
| Зааварчилгаа |
Онцлог, давуу тал
■Загвар дахь gDNA-г 2 минутын дотор арилгах боломжтой gDNA-г үр дүнтэй устгах чадвартай.
■ Энэ нь lncRNA-ийн транскрипцийг үр дүнтэй буцаах боломжтой.Урвуу транскрипцийн бүтээгдэхүүнийг qPCR-д оруулах үед Ct утга нь уламжлалт урвуу транскрипцийн системийнхээс бага байна.
■ Үр дүнтэй урвуу транскрипцийн систем, cDNA-ийн эхний хэлхээний нийлэгжилтийг дуусгахад ердөө 15 минут л болно.
■ Нарийн төвөгтэй загварууд: GC-ийн өндөр агуулгатай, нарийн төвөгтэй хоёрдогч бүтэцтэй загваруудыг мөн өндөр үр ашигтайгаар эргүүлж болно.
■ Өндөр мэдрэмжтэй урвуу транскрипцийн систем, pg түвшний загварууд нь өндөр чанарын cDNA авах боломжтой.
■ Урвуу транскрипцийн систем нь өндөр дулааны тогтвортой байдал, оновчтой урвалын температур нь 42 байна℃, мөн энэ нь 50-д урвуу транскрипцийн сайн гүйцэтгэлтэй хэвээр байна℃.
Иж бүрдэл програм
lncRNA харьцангуй тоон шинжилгээ.
lncRNA үнэмлэхүй тоон шинжилгээ.
Энэ нь РНХ вирус гэх мэт РНХ-ийн ул мөрийг хурдан бөгөөд үнэн зөв шинжлэх боломжтой.
Өндөр GC агууламжтай эсвэл нарийн төвөгтэй хоёрдогч бүтэцтэй РНХ загваруудын урвуу транскрипци.
Ажлын урсгал
Хадгалалт ба Хадгалах хугацаа
Багцыг -20 хэмд хадгалах ёстой°C. Бүтээгдэхүүнийг тогтмол температуртай хөргөгчинд -20 хэмд хадгална°C хүлээн авсны дараа шууд.Хадгалах нөхцөл нь тохиромжтой бол 1 жилийн хүчинтэй хугацаанд бүтээгдэхүүн нь гүйцэтгэлийг муутгахгүй.
Асуудлын шинжилгээний гарын авлага
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-тусгай олшруулалт
1. Үндэслэлгүй праймер дизайн
Зөвлөмж: Праймерын дизайны зарчмуудын дагуу праймерыг зохион бүтээх.
2. Геномын үлдэгдэл.
Зөвлөмж: ГДНХ-г арилгах урвалын эхний шат нь 42°C байх ба хариу өгөх хугацааг 5 минут хүртэл сунгаж болно.
RT-qPCR-ээр олшруулах дохио байхгүй
1. РНХ задарсан.
Зөвлөмж: РНХ гаргаж авах материал нь аль болох шинэхэн байх ба өндөр чанартай, өндөр цэвэршилттэй РНХ ашиглах ёстой.
2. РНХ нь дарангуйлагчдыг агуулдаг.
Зөвлөмж: Урвуу транскрипцийн дарангуйлагчид ерөнхийдөө SDS, гуанидины давс, EDTA гэх мэт орно. Дарангуйлагчийг арилгахын тулд РНХ-ийн тунадасыг 70% этанолоор угаахыг зөвлөж байна.
3. Праймерын дизайны асуудал.
Зөвлөмж: Праймерын дизайны зарчмын дагуу праймеруудыг дахин төлөвлөхдөө шалгалт хийх.
Зорилтот зурвас хоосон удирдлагад гарч ирнэ
1. Ашиглалтын багаж хэрэгсэл, урвалж бодисыг бохирдуулах.
Зөвлөмж: Туршилтад зориулсан бүх урвалж эсвэл төхөөрөмжийг автоклавт хийнэ.ДНХ-ийн дээжийг соруур руу сорох эсвэл центрифугийн хоолойноос асгарахаас сэргийлэхийн тулд болгоомжтой, зөөлөн харьцах хэрэгтэй.
2. ПГУ-ын урвалын системийг бэлтгэх явцад бохирдол үүссэн.
Зөвлөмж: Харьцахдаа шаардлагатай урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээг авна уу: латекс бээлий өмсөх, шүүлтүүрийн үзүүр ашиглах.Бодит цагийн ПГУ-ын хольцыг бохирдлоос хамгаалсан системд хэрэглээрэй.
3. Праймерууд нь доройтсон.
Зөвлөмж: СDS-PAGE электрофорез ашиглан праймерууд муудсан эсэхийг илрүүлж, флюресценц илрүүлэх туршилтыг шинэ праймераар солино.
Заавар гарын авлага:
