Шууд RT-qPCR хэрэгсэл
Багцын тодорхойлолт:
◮ Foregene-ийн бүтээсэн Foreasy урвуу транскриптаза ба Foreasy HS Taq ДНХ полимеразыг ашиглан өвөрмөц урвалын буфер бүхий шууд RT-qPCR хэрэгсэл нь энэхүү иж бүрдлийг хүчтэй эсэргүүцэлтэй, нийцтэй болгодог бөгөөд Foregene Lysis системийг загвар болгон ашиглах урвалыг шууд турших боломжтой.Энэхүү иж бүрдэл нь COVID-19 нуклейн хүчил илрүүлэх иж бүрдэл болон бусад эмгэг төрүүлэгч бактерийн нуклейн хүчлийг илрүүлэх хэрэгсэл боловсруулахад хэрэглэгдэж болно.
Тодорхойлолт
Шууд RT-qPCR хэрэгсэл нь тусад нь савласан RT-qPCR буфер болон өндөр үр ашигтай ферментээр хангадаг.холимог (Taq、M-MLV、RI)， арын иж бүрдэл болон системийг бий болгоход тохиромжтой.тохируулга, энгийн баталгаажуулалтын хүрээнд.
Үзүүлэлтүүд
500Т, 50000Т
Иж бүрдэл хэсгүүд
| Багцын агуулга (20 мкл урвалын систем) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 Т | 50,000 Т | |
| Шууд ферментийн хольц | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2× Шууд RT-qPCR буфер | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Заавар | 1 | 1 |
Үйлдлийн алхамууд
Урвалж бэлтгэхийн өмнө иж бүрдэл дэх бүх урвалжийг тасалгааны температурт гэсгээж, зөөлөн холино.
A: Бэлтгэх of загвар болон урвалж
1. Бэлтгэсэн РНХ загвар (РНХ-ийн загварыг гаргаж авах, цэвэршүүлэхийн тулд Foregene Total RNA Isolation Kit цуврал иж бүрдлийг ашиглахыг зөвлөж байна) эсвэл дээжийг хагалах бүтээгдэхүүн (Foregene Lysis системийг ашиглахыг зөвлөж байна), тусгай праймер (10 μM) болон бусад холбогдох материал, багаж хэрэгслийг бэлтгэ.
2. 2× Шууд RT-qPCR буфер, RNase-гүй ddH2O болон 20× ROX лавлагаа будаг (хэрэв байгаа бол) хийнэ.'шаардлагатай) мөстэй хайрцагт хийж, тэдгээрийг байгалийн аргаар хайлуулж, зөөлөн холино.
B: Бэлтгэх of RT-qPCR систем
Хүснэгт 1 : Бэлтгэх of RT-qPCR sсистем
| Бүрэлдэхүүн хэсэг | Эзлэхүүн | Эцсийн төвлөрөл |
| 2× Шууд RT-qPCR буфер | 10 мкл | 1× |
| Шууд ферментийн хольц | 1мкЛ | |
| Урагшаа праймер (10 мкм) | 0.8 мкл | 50-900нМ |
| Урвуу праймер (10 мкм) | 0.8 мкл | 50-900нМ |
| Сорьц (4 мкм) | 1мкЛ | 200нМ |
| Загвар (РНХ эсвэл Лизат) | X мкл | |
| 20×ROX лавлагаа будаг | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) мкл | |
| Нийт эзлэхүүн | 20мкЛ |
C: Тохируулах нь RT-qPCR урвал хөтөлбөр
Хүснэгт 2 : RT-qPCR урвалon хөтөлбөр тохиргоо (төлөө жишээ: хоёр-алхам арга)
| Алхам | Температур | Цаг хугацаа | Цикл | Агуулга | |
| 1 | 50℃ | 15 мин | 1* | 1 | Урвуу хуулбар |
| 2 | 95℃ | 1 мин | 1 | Урьдчилан денатураци | |
| 3 | 95℃ | 10 сек | 40-45 | Денатураци | |
| 60℃ | 30 секунд 2* | Анги/өргөтгөл | |||
Хадгалалт ба Хадгалах хугацаа
-Иж бүрдлийг -20 хэмд хадгална± 5℃.Хүчинтэй байх хугацаа 12 сар байна.
-Дахин давтагдах хөлдөөх гэсэлтийн мөчлөгөөс (<5 цикл) зайлсхий.
